题目内容
【题目】为了提高菊花抗冻能力，研究者从其他生物中克隆出抗冻基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。回答下列问题：
（1）为使抗冻基因C在菊花细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的_________、_______之间。
（2）若想了解C基因是否整合到菊花染色体上，检测方法是采用_________________技术。
（3）若获得的转基因植株（抗冻基因C已经整合到菊花的基因组中）抗冻能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是__________________________。
（4）借助农杆菌将重组质粒导入菊花细胞，在该过程中需添加酚类物质，目的是________从个体水平检测抗冻基因C的遗传特性是否正常表达的方法是______________________。
（5）科研工作者可以利用PCR技术获得更多的抗冻基因C，那么利用PCR技术获取目的基因的前提是 ______________________________________________________。
【答案】启动子 终止子 DNA分子杂交技术 目的基因的转录或翻译异常 吸引农杆菌感染菊花细胞 将转基因菊花放寒冷（或低温）条件下培养，观察其生长状况 要有一段已知目的基因的核苷酸序列
【解析】
基因工程的操作步骤是：1、获取目的基因（从基因组文库中获取或利用PCR技术扩增目的基因）、2、基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心）3、将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物）4、目的基因的检测与鉴定 （DNA分子杂交技术,分子杂交技术、抗原抗体杂交）。
（1）为抗冻基因C在菊花细胞中高效表达，需要把目的基因片段插入表达载体的启动子、终止子之间，其中启动子的功能是启动目的基因的转录过程，终止子的功能是终止目的基因的转录过程。
（2）检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上，可采用DNA分子杂交技术。
（3）若获得的转基因植株（抗冻基因C已经整合到菊花的基因组中）而抗冻能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是目的基因的转录或翻译异常。
（4）将基因表达载体导入植物（菊花）细胞常用的方法是农杆菌转化法，在该过程中需添加酚类物质，目的是吸引农杆菌感染菊花细胞。从个体水平检测抗冻基因C的遗传特性是否正常表达的方法是，将转基因菊花放寒冷（或低温）条件下培养，观察其生长状况。
（5）利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
