题目内容
【题目】研究表明从母瘤分离脱落的癌细胞首先要与正常细胞粘附才能转移。为研究物质X对癌细胞与毛细血管内皮细胞间粘附的影响,请根据以下提供的实验材料与用具,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具:培养瓶若干个、液体培养基、物质X、癌细胞细胞株、内皮细胞悬液、CO2培养箱、PBS溶液(用于洗去未粘附的细胞)
(要求与说明:不考虑培养液成分变化对培养物的影响;实验条件适宜)
(1)实验思路:
①取培养瓶若干个均分为三组,分别加入等量且适量的液体培养基和内皮细胞悬液,置于37℃的CO2培养箱中培养24h,使培养瓶中铺满单层内皮细胞。
②_____。
③同时分别_____。置于37℃的CO2培养箱中培养一段时间。
④用PBS溶液洗去未贴壁的细胞,测定相关值并计算细胞粘附率。
⑤对实验数据进行分析与处理。
(2)下图为实验所测得的细胞粘附率,请根据图示结果,用文字描述该实验结果并得出实验结论:
结果:_____。
结论:_____。
(3)分析与讨论
①实验用的癌细胞细胞株可以通过_____法建立。获取癌细胞时需用_____处理癌细胞株,将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为_____培养。
②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是_____。根据实验可推测:物质X可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率,来达到_____的作用。
【答案】加入用液体培养基配制的不同浓度的物质X(浓度为100和300μg/ml),对照组加入等体积的液体培养基 取等量的癌细胞转入上述培养瓶中(取等量的癌细胞转入铺满单层内皮细胞的培养瓶中) 与正常对照组相比,加入物质X后,癌细胞与内皮细胞间的粘附率明显降低,同时随着剂量越高,癌细胞与内皮细胞间的粘附率下降越明显。 物质X可降低癌细胞与内皮细胞间的粘附率。(而且作用效果与物质X的浓度有关) 克隆培养 胰蛋白酶 传代 癌细胞膜表面粘连蛋白(糖蛋白)减少 抑制癌细胞转移
【解析】
1、本实验的目的是为了研究不同浓度的物质X对癌细胞与毛细血管内皮细胞间粘附的影响,因此自变量是不同浓度放入物质X溶液,因变量是细胞粘附率,其余均为无关变量。
2、实验设计应该遵循对照原则和单一变量原则,此外还应该遵循平行重复原则,这样可以减小实验的误差。
(1)实验思路:根据分析该实验的自变量和因变量,所以在步骤②中设计自变量。
②加入用液体培养基配制的不同浓度的物质X(浓度为100和300μg/ml),对照组加入等体积的液体培养基。
③同时分别取等量的癌细胞转入上述培养瓶中(取等量的癌细胞转入铺满单层内皮细胞的培养瓶中)。置于37℃的CO2培养箱中培养一段时间。
(2)结果:与正常对照组相比,加入物质X后,癌细胞与内皮细胞间的粘附率明显降低,同时随着剂量越高,癌细胞与内皮细胞间的粘附率下降越明显。
结论:物质X可降低癌细胞与内皮细胞间的粘附率。(而且作用效果与物质X的浓度有关)。
(3)分析与讨论:
①实验用的癌细胞细胞株可以通过克隆培养法建立。获取癌细胞时需用胰蛋白酶,将其分散成单个细胞,将癌细胞转入含内皮细胞的培养瓶后所进行的培养称为克隆培养。
②导致癌细胞从母瘤分离脱落的原因可能是癌细胞膜表面粘连蛋白(糖蛋白)减少。根据实验可推测:物质X可能是通过减少肿瘤细胞与毛细血管内皮细胞的粘附率,来达到抑制癌细胞转移的作用。