题目内容
【题目】下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图甲、图乙中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。用图中质粒和目的基因构建重组质粒,最宜选用哪两种限制酶切割
A.BamHⅠ和HindⅢB.BclⅠ和HindⅢ
C.BamHⅠ和Sau3AⅠD.BclⅠ和Sau3AⅠ
【答案】B
【解析】
考查基因工程的原理。
构建重组DNA时一般采用用相同的限制酶切割目的基因和运载体以获得相同的黏性末端便于目的基因和运载体的连接。本题考查用不同的限制酶分别切割运载体和目的基因进而构建重组DNA的方法。
由题知,选择的限制酶应在目的基因两端和质粒上均有识别位点,故排除Sau3A酶;BamHⅠ酶的切割位点位于质粒的四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因中间,若选用此酶切割会破坏这两种抗性基因,影响后续重组质粒的筛选,故排除BamHⅠ酶,因此应选用BclⅠ和HindⅢ酶进行切割,故答案为B。
故选B。
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