Question

【题目】自生固氮菌在土壤中能独立将大气中的氮气转化为农作物可利用的氨。自生固氮菌制成的肥料具有经济、干净等优点，研究小组为探究几种常用农药对自生固氮菌的影响，进行了下列实验，回答下列问题：

（1）将10g葡萄糖、0．2gKH2PO4，0．2gMgSO4，0．2gCaSO4，0．2gNaCl，0．2gCaCO3、15g______，溶解后用蒸馏水定容至1000mL，分装到锥形瓶中，放入____________中灭菌15-30分钟，冷却到一定温度，在______附近分装倒平板。

（2）该配方的培养基对自生固氮菌有选择作用的原因是____________。

（3）采用______法将自生固氮菌接种到不同平板上，将浸泡过不同种类和浓度的农药的圆形滤纸片分别放在不同平板上，做上标记，培养一定时间，测量并记录______的平均直径。

（4）接种前，将平板置于恒温培养箱中一段时间的目的是____________。

Answer 1

【答案】琼脂??? 高压蒸汽灭菌锅??? 酒精灯火焰??? 培养基不含氮源，自生固氮菌能独立将空气中的氮气转化为氨，为自身提供氮源，其他微生物不能独立利用氮气??? 稀释涂布平板??? 抑菌圈（透明圈）??? 检验培养基是否灭菌合格，达到无菌要求???

【解析】

培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。

（1）要制作固体培养基，需要加入琼脂作为凝固剂，对培养基需要进行高压蒸汽灭菌处理，倒平板时，需要避免杂菌污染，故需要在酒精灯附近进行操作。

（2）该培养基不含氮源，自生固氮菌能独立将空气中的氮气转化为氨，为自身提供氮源，其他微生物不能独立利用氮气，故可以选择自生固氮菌。

（3）要判断农药对自生固氮菌的作用情况，需要对平板中的菌落进行计数，应该采用稀释涂布平板法将自生固氮菌接种到不同平板上，将浸泡过不同种类和浓度的农药的圆形滤纸片分别放在不同平板上，做上标记。培养一定时间，测量并记录抑菌圈的平均直径，抑菌圈的平均直径越大，说明抑菌效果越好。

（4）接种前，为了检验培养基是否灭菌合格，需要将平板置于恒温培养箱中一段时间。