题目内容
【题目】EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:
请回答下列问题:
(1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到____________,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射_____________激素 以排出更多的卵子,培养到_____________时期与获能的精子相遇时,精子首先发生___________反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中___________能驱动基因的转录。 (4)采用________技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及_______等物质。
(5)当胚胎发育至__________时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将__________均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行_________。
【答案】(1)cDNA
(2)促性腺,减数第二次,顶体
(3)启动子
(4)显微注射,血清
(5)桑椹胚或囊胚,内细胞团,性别鉴定
【解析】(1)获取目的基因的方法可通过反转录法,故从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到cDNA,再通过PCR技术获得大量EPO基因。
(2)为使供体母鼠超数排卵,需注射促性腺激素以排出更多的卵子,卵子需培养到减数第二次分裂中期时才能与获能的精子相遇时,精子首先发生顶体反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。
(3)①过程为形成基因表达载体的过程,基因表达载体包括启动子、终止子等,其中启动子为RNA聚合酶结合的部位,能驱动基因的转录。
(4)
(5)胚胎移植时一般在桑椹胚或囊胚时期,为获得更多转基因胚胎,要将囊胚的内细胞团均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定。