Question

【题目】甲、乙图为两种常见的平板划线法:连续划线法和四区划线法,前者适用于纯化菌较少的样品,后者适宜于纯化菌较多的样品。据图回答:

(1)土壤是微生物生活大本营,某兴趣小组欲从土壤中分离枯草芽孢杆菌以制备某碱性蛋白酶，宜选择图____所示方法划线培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌,则应采用____法。

(2)图乙中依次进行四区划线,四区的面积要求为C<D<E<F,F区面积最大有利于获得____。注意F区的划线不要与____(填字母)区相连。

(3)在制备甲所需培养基时,当温度降至大约为____时适合倒平板；乙培养基在划线时接种环至少要灼烧____次。

(4)若应用固定化技术提高上述碱性蛋白酶的利用率,且减少产物中的杂质,则通常采用____法。

(5)在最适温度下,一定时间内,分解1 mL10%脱脂奶粉的酶量为一个酶活力单位(U)。科研小组将不同来源的碱性蛋白酶分成七组进行活力检测,结果如上图丙所示。据图分析,酶催化能力最强的是____组。

Answer 1

【答案】乙 稀释涂布平板 单个菌落 C(或C、D) 50 ℃ 5 化学结合(物理吸附) A6

【解析】

由题文描述和图示分析可知：该题综合考查学生对微生物的纯化培养及固定化酶等相关知识的识记和理解能力，以及识图分析能力。

(1) 四区划线法适宜于纯化菌较多的样品。土壤是微生物生活的大本营，含有大量的不同微生物，从土壤中分离枯草芽孢杆菌，宜采用图乙所示的平板划线法培养。若要分离和统计枯草芽孢杆菌，则应采用稀释涂布平板法。

(2) 平板划线操作，在数次划线后，可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的单菌落，因此F区面积最大有利于获得大量的单菌落以供挑选纯种用。据图乙分析，F区划线不要与C(或C、D)区相连。

(3) 在制备甲培养基时，当温度降至大约为50℃时适合倒平板。为了避免杂菌污染，每次接种前和接种后都需要对接种环进行灼烧灭菌，图乙中共划线4次，因此在划线时接种环至少要灼烧5次。

(4) 一般而言，固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法进行固定。

(5) 依题意并分析图丙可知：A6组凝固1mL10%脱脂奶粉所需要的酶量最少，说明A6组的酶催化能力最强。