题目内容
【题目】回答下列有关果胶酶生产及固定化应用的问题:
(1)菌种筛选:为了获得高产果胶酶的菌株,用射线处理一些霉菌后,稀释并接种在____________果胶为唯一碳源的培养基中培养,此培养基的pH要求___________。
(2)菌种鉴定:通过在____________(物理性质)培养基上观察____________,实现菌种的鉴定。
(3)果胶酶的固定化:取磁性壳聚糖微球固体颗粒,加入果胶酶溶液,30℃条件下振荡lh后装柱,上述固定化果胶酶的方法属于____________。反应柱使用后要用____________洗涤,放置于____________保存。
(4)果胶酶活力测定:以lg果胶酶单位时间催化产生的主要产物____________的量计算酶的活力。已知3、5——二硝基水杨酸与果胶水解主要产物共热,能产生棕红色的氨基化合物,在一定范围内产物的量和反应液颜色深浅成正比,可用_________________法测定产物的量。此方法需要制作标准曲线,其中纵坐标一般为____________。
【答案】低浓度 中性、偏酸 固体 菌落的形态特征 吸附法 10倍体积蒸馏水 4℃(冰箱) 半乳糖醛酸 光电比色 光密度值(OD值)
【解析】
1、用射线处理一些霉菌后,稀释并接种在低浓度果胶为唯一碳源的培养基中培养可以获得高产果胶酶的菌株,
2、磁性壳聚糖微球表面的氨基可以与蛋白质分子的羧基反应,从而将蛋白质分子吸附固定,因此该方法固定化果胶酶利用的是吸附法。实验装置中,30℃条件下震荡1h,装入图所示的反应柱中,需要用蒸馏水洗去未固定的游离果胶酶,然后放置在4℃冰箱中保存。
3、酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力,酶活性的高低可以用在一定条件下,酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。
4、果胶酶水解果胶主要生成半乳糖醛酸,以1g果胶酶单位时间内催化产生的半乳糖醛酸的量计算酶的活力。此方法需要制作标准曲线,该标准曲线的横坐标应该是半乳糖醛酸的含量,纵坐标一般为光密度值(OD值)。
(1)菌种筛选:为了获得高产果胶酶的菌株,用射线处理一些霉菌后,稀释并接种在低浓度果胶为唯一碳源的培养基中培养,此培养基的pH要求中性偏酸。
(2)菌种鉴定:通过在固体物理性质)培养基上观察菌落的形态特征,实现菌种的鉴定。
(3)果胶酶的固定化:取磁性壳聚糖微球固体颗粒,加入果胶酶溶液,30℃条件下振荡lh后装柱,上述固定化果胶酶的方法属于吸附法。反应柱使用后要用10倍体积蒸馏水洗涤,放置于4℃(冰箱)保存。
(4)果胶酶活力测定:以lg果胶酶单位时间催化产生的主要产物半乳糖醛酸的量计算酶的活力。己知3、5——二硝基水杨酸与果胶水解主要产物共热,能产生棕红色的氨基化合物,在一定范围内产物的量和反应液颜色深浅成正比,可用光电比色法测定产物的量。此方法需要制作标准曲线,其中纵坐标一般为光密度值(OD值)。