Question

【题目】为调查某地土质状况，科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。请回答下列问题。

（1）土壤中的尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成____后，才能被植物利用。

（2）为筛选出分解尿素的细菌，应配制____的培养基以达到选择的作用。分解尿素的细菌不能以CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是 ___（填“自养”或“异养”）型生物。配制好的培养基需经过高压蒸汽灭菌，在装入待灭菌物品时，不要摆得太挤，以免____。

（3）对不同深度土壤取样统计菌落数目时，一般采用____方法接种，接种后需每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止____。对分离得到的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，需加入____，如果pH____，指示剂将变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。

Answer 1

【答案】氨（或NH3） 以尿素为唯一氮源 异养 妨碍蒸汽流通 稀释涂布平板法 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 酚红指示剂 升高

【解析】

1、微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，以尿素作为氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

（1）尿素是一种重要的农家肥，但尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨后，才能被植物利用。

（2）为筛选出分解尿素的细菌，在配制培养基时应选择以尿素作为唯一氮源。分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，但可用葡萄糖作为碳源，由此推测分解尿素的细菌是异养型生物。将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因影响蒸汽流通而影响灭菌的效果。

（3）需要对菌落进行计数时，需要采用的接种方法是稀释涂布平板法。菌落的培养一般每隔24h统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养后，若pH升高，出现红色就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。