Question

【题目】下表是某固氮菌的培养基的配方， 请回答相关问题：

物质	用量	物质	用量
KH2PO4	0.2g	K2HPO4	0.8g
MgSO4.7H2O	0.2g	CaSO4.2H2O	0.1g
Na2MoO4.2H20	微量	甘露醇	20g
FeCl3	微量	蒸馏水	1000mL
琼脂	15g	PH	7.2

（1）此固氮菌所用氮源是_____。 从表中可知，该培养基属于_____（ 物理性质划分）培养基。 在培养基倒平板的过程中， 在_____过程中调 PH 值， 平板冷却后应该_____（放置方法）。

（2）此培养基能抑制其他微生物，其原因是_____。

（3）如要进行菌落计数， 则需要_____（ 接种方法）。若培养基灭菌彻底， 某同学同时对样品接种了 3 个平板， 其菌落数分别为 40、 42、 61。 其中 61个菌落的平板与其余平板的差异较大，分析可能的原因有：_______________（ 至少写出两点）。

Answer 1

【答案】N2 固体 溶化之后灭菌之前 倒置 此培养基缺乏氮源 稀释涂布平板法 接种过程有污染，接种前涂布器未消毒灼烧，菌液量加多了，菌液接种前未摇动，吸取了下层菌液

【解析】

分析培养基成分可知，该培养基中加入了琼脂作为凝固剂，因此依物理性质，该培养基属于固体培养基；培养基中没有氮源，不能够固氮的微生物在该培养基上不能生长。对培养基进行灭菌应采用高压蒸汽灭菌法，培养基配制时，应先调pH后灭菌。

（1）分析表格可知，该培养基中没有氮源，因此该固氮菌所用氮源是空气中的氮气。该培养基中加入琼脂作为凝固剂，因此属于固体培养基。不论何种培养基，为防止灭菌后培养基被污染，在各成分都溶化后灭菌之前，要先进行PH 调整。平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，为防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将冷凝后的平板倒置。

（2）微生物生长需要碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，此培养基中缺少氮源，不能利用空气中氮气的微生物则不能再此培养基上生长。

（3）稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目。培养基灭菌彻底，在统计的3个平板中，两个平板菌落数为40左右，有一个为61，数目偏大，可能的原因有：接种过程有污染；接种前涂布器未消毒灼烧；菌液量加多了；菌液接种前未摇动，吸取了下层菌液等。