Question

1979年，科学家将鼠体内的能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中发现了胰岛素。如下图所示，请据图回答：

（1）图中［2］、［5］、［3］、［7］表示通过_____________的途径，获得_________的过程。

（2）图中［3］代表_________，在它的作用是______________；［9］代表_____________，在它的作用实质是两个DNA的单链末端之间形成____________________键。

（3）［8］代表_________，其往往含有_________基因，以便将来检测。如何构建［8］呢？其步骤是：

①_______________________________________________________________

②_______________________________________________________________

③_______________________________________________________________

（4）图中［10］表示将_________的过程，为使此过程顺利进行，一般须将［11］用________处理，以增大［11］细胞壁的_________。

（5）［11］表示［8］随大肠杆菌的繁殖而进行___________。

（6）如在大肠杆菌细胞内发现了胰岛素，说明_________________________。

Answer 1

（1）从供体细胞的DNA中直接分离基因  目的基因 

（2）限制性内切酶  识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开      DNA连接酶  磷酸二酯键

（3）重组DNA    标记  步骤：

①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个黏性末端的切口；

②用同种限制酶切断目的基因，产生相同的黏性末端；

③将切下的基因片段，插入到质粒的切口处，再加上适量DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒。

（4）重组DNA导入受体细胞  CaCl₂  通透性  

（5）复制

（6）目的基因完成了表达的过程