题目内容

【题目】为了调查赣江的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

(1)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是________和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是____________________。倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是__________________

(2)该小组可采用上图B所示的_____________(方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________________

(3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是__________________________________

(4)在纯化过程中,在固体培养基上划线分离过程中,正确的操作是__________

A.每次划线时,接种环都需要蘸菌液一次

B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种

C.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

D.在超净平台中进行接种时,不能关闭过滤风

【答案】1)调整pH 高压蒸汽灭菌 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染

2)稀释涂布平板法 检测培养基平板灭菌是否合格 38×107

3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落不连续单个菌落

4D

【解析】1)培养基的制作过程主要有计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、分装.培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌.倒平板时要待平板冷凝后,为防止培养皿盖上的泠凝水落入培养基造成污染,常常需要将平板倒置。

2)微生物培养过程应该进行无菌操作,配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌,可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底;由由题意知1ml水样中的菌落数是(39+38+37÷3÷0.1×100=3.8×104个,每升水样中的活菌数为3.8×104×103=3.8×107

3)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌;在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线的目的是;将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

4)接种环只需要蘸菌液一次,进行连续几次划线操作,A错误;划线分离时,不能把接种环深入到培养基中进行接种,只能在培养基表面进行划线操作,B错误;划线时要将最后一区的划线不能与第一区的划线相连,C错误;在超净平台中进行接种时,不能关闭过滤风,D正确。

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【题目】乳头瘤病毒(HPV)持续感染可导致宫颈癌发生。科研人员将HPV外壳L1蛋白基因与在人体中不能复制但能有效表达外源基因的痘苗病毒重组,制备新型疫苗。

(1)用痘苗病毒感染鸡胚细胞,一段时间后洗去吸附的病毒,将鸡胚细胞转入液体培养基中培养,培养基中加入适量抗生素以避免_____________。在培养基中加入L1蛋白基因与质粒连接构建的重组质粒,使L1蛋白基因与_____________在鸡胚细胞内发生DNA重组,得到重组病毒疫苗。依据L1基因序列设计引物扩增重组病毒DNA,以检测______________________

(2)为研究重组疫苗的保护作用,将生长发育状况一致的小鼠随机均分为三组,1组注射用PBS缓冲液配制的重组病毒疫苗100μL,2组注射_____________作为对照,3组注射_____________作为空白对照。

(3)给上述三组小鼠皮下注射C3细胞(含有HPV基因的癌细胞),观察、记录小鼠成瘤情况,结果如下。

组别

各组平均瘤重(g)

1

0.192

2

0.347

3

0.916

据实验结果分析,尽管各组小鼠都可成瘤,但实验组小鼠__________________________,说明重组病毒疫苗具有一定的免疫保护作用。接种重组病毒疫苗的小鼠体内表达_____________作为抗原,刺激机体产生特异性免疫。皮下注射C3细胞时,HPV引起_____________细胞迅速增殖、分化,产生大量抗体,从而起到免疫保护作用。根据免疫学知识,注射疫苗后,只有诱发出机体的_____________免疫,才能有效清除癌细胞。

(4)若欲检验重组病毒疫苗是否有治疗作用,对小鼠进行的处理最恰当的是_____________(选填下列字母)。

a.先注射HPV病毒,一段时间后注射重组病毒疫苗

b.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射HPV病毒

c.先注射C3细胞,一段时间后注射重组病毒疫苗

d.先注射重组病毒疫苗,一段时间后再注射C3细胞

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