题目内容

【题目】下图表示血红蛋白的提取和分离实验的部分实验装置,回答下列问题:

(1)左装置中A是_______________.B是__________,该装置用于__________,目的是_________

(2)右图分离蛋白质的方法叫做_______,该方法依据的原理是_______,待______时,用试管收集流出液,每管收集5 mL,连续收集。

(3)若发现I中有气泡,则需_________

【答案】磷酸缓冲液 血红蛋白溶液 透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 红色的蛋白质接近色谱柱底端 重新装填

【解析】

血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:样品处理、粗分离纯化、纯度鉴定,其中样品处理包括、红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、收集血红蛋白溶液四个步骤。血红蛋白提取和分离原理:蛋白质的物理性质如形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别,由此提取和分离各种蛋白质;凝胶色谱法原理:分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程长,流动慢。

1)左装置中有一个透析袋,据图分析可知,应为除去透析袋中血红蛋白溶液中的易溶于水的小分子杂质,其中A是磷酸缓冲液,抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定,B是血红蛋白溶液;该装置用于透析(粗分离),通过透析,分子量小的能通过透析袋出来,目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。

2)右图中为凝胶色谱柱,故分离蛋白质的方法叫做凝胶色谱法;在凝胶色谱柱中,分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程短,流动快,故该方法依据的原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质;待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,用试管收集流出液,每管收集5 mL,连续收集。

3)若发现I中有气泡,则可能会导致不同分子量的物质同时流出,则凝胶色谱柱需重新装填。

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