题目内容
【题目】下表是某种微生物培养基的配方表，请据表回答：
牛肉膏 | 蛋白胨 | NaCl | 琼脂 | 水 |
0.5g | 1g | 0.5g | 2g | 200mL |
（1）此培养基的营养成分有五类，其中蛋白胨提供的营养物质是________________。
（2）在培养基制备过程中，各种成分溶化后分装前，必须的操作是______________。
（3）微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是______________。（填序号）
①化学消毒 ②高压蒸汽灭菌 ③干热灭菌 ④紫外灭菌 ⑤灼烧灭菌 ⑥巴氏消毒法
（4）巴氏消毒法与煮沸消毒法相比，其优点是___________________。
（5）用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择群落在__________的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为_______________________________________。
（6）纯化菌株时，通常使用的划线工具是_____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有______________。
【答案】碳源、氮源、生长因子 调节pH ②③⑤①④⑥ 在达到消毒目的的同时，营养物质损失较少 30～300 1.5×107 接种环 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始
【解析】
1、培养基的成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子．
2、制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板．
3、消毒和灭菌
4、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
（1）微生物培养基的成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。蛋白胨在培养基可以为微生物提供碳源、氮源和生长因子。
（2）配制培养基时为保证无菌，各种成分在溶化后分装前必须进行调节pH，然后再灭菌。
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，培养皿常用干热灭菌法灭菌，接种环常用灼烧灭菌，双手应用化学药剂消毒，空气可用紫外线杀菌，牛奶常用巴氏消毒法消毒，故对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法的正确顺序依次是②③⑤①④⑥。
（4）与煮沸消毒法相比，巴氏消毒法在较低温度下，既可以杀死病菌，又能保持物品中营养物质损失较少和风味不变。
（5）使用稀释涂布平板法统计活菌数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2mL，则每毫升样品中的细菌数为30÷0.2×105=1.5×107个。
