[题目]回答与基因工程和植物克隆有关的问题:(1)影响重组质粒导入受体菌的因素有:受体菌细胞壁的通透性.受体菌的生长状态.培养条件以及 (答出2点即可).经转化.培养后.目的基因能和质粒一起在大量扩增.(2)聚一B羟基丁酯是某些细菌的储能物质.把来源于产碱杆菌的合成聚一B羟基丁酯(可用于生产可降解的生物塑料)有关基因转入到拟南芥后.在拟南� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

【题目】回答与基因工程和植物克隆有关的问题：

（1）影响重组质粒导入受体菌的因素有：受体菌细胞壁的通透性、受体菌的生长状态、培养条件以及________________（答出2点即可）。经转化、培养后，目的基因能和质粒一起在___________大量扩增。

（2）聚一B羟基丁酯是某些细菌的储能物质，把来源于产碱杆菌的合成聚一B羟基丁酯（可用于生产可降解的生物塑料）有关基因转入到拟南芥后，在拟南芥可大量生产出聚一B羟基丁酯；在此过程中需用___________________酶建立起产碱杆菌的______________，从而获得所需的目的基因；若为工业化生产则将拟南芥培养至____________，从中提取聚一B羟基丁酯。

（3）利用植物的克隆技术大量繁殖名贵花卉时，需将组织块放在____________上进行培养获得创伤组织，以适当配比的___________________________________诱导创伤组织，直到再生新植株。

【答案】重组质粒的的浓度和重组质粒的结构、受体细胞的密度和生长状态等宿主细胞（受体细胞）内 DNA限制性核酸内切酶和DNA连接酶基因文库愈伤组织（创伤组织）半固体培养基营养物质和生长调节剂

【解析】

基因工程一般要经历四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。（1）获得目的基因的方法：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（化学合成）。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）重组质粒导入受体细胞受多种因素的影响，主要从两方面考虑，一是受体菌方面，包括受体菌的生长状态、受体菌细胞壁的通透性、受体细胞的密度和生长状态、培养条件等；二是重组质粒方面，包括重组质粒的的浓度和重组质粒的结构等。重组质粒导入受体细胞后，目的基因能和质粒一起在宿主细胞增殖。

（2）基因工程用到的酶工具包括DNA限制性核酸内切酶和DNA连接酶，在这两种酶的作用下，建立产碱杆菌的基因文库，为获取目的基因做准备；进行工业化生产，可将拟南芥培养成愈伤组织，以便大规模提取聚一B羟基丁酯。

（3）植物组织培养的过程：配置半固体培养基——获取外植体——脱分化形成愈伤组织——再分化形成胚状体——试管苗——移栽。在诱导愈伤组织形成过程中通常加入适当比例的营养物质和植物生长调节剂。一般情况下：生长素/细胞分裂素比值高，有利于根分化，抑制芽的形成；比值低，有利于芽分化，抑制根形成；比例适中，有利于愈伤组织生长。