Question

PCR技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程，请据图分析回答问题。

(1)A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是(　　)。

A．该过程用耐高温的解旋酶破坏氢键

B．该过程用限制酶破坏磷酸二酯键

C．该过程不需要解旋酶的作用

D．该过程与人体细胞的过程完全相同

(2)C过程要用到的酶是________，这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以加入________次，________(需要、不需要)再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有__________________________________________________________________。

(3)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95 ℃～55 ℃～72 ℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占________。

Answer 1

【解析】　本题考查PCR的过程和条件。在熟知细胞内DNA复制过程和PCR过程异同点的前提下，会运用DNA复制的有关原理是解答本题的关键。(1)高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变为单链，因此A过程不需要解旋酶的参与。(2)C过程为PCR技术的延伸阶段，当系统温度上升至72  ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下合成新的DNA链。TaqDNA聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性加入即可。(3)PCR技术遵循半保留复制的特点。经过3次循环，共产生2³个DNA分子，其中有2个DNA分子含有¹⁵N标记。

【答案】　(1)C　(2)TaqDNA聚合酶　一　不需要　DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行

(3)25%