题目内容
【题目】高温胁迫是影响植物生长发育的重要因素之一，高温会使番茄的生长发育受到限制。科学家将来自土壤细菌中的codA基因转入番茄，使番茄对高温的耐受性大于野生型番茄。
回答下列问题：
(1)过程①获得的DNA片段________(填“可以”、“部分可以”或“不可以”)实现物种间的基因交流。采用PCR技术扩增codA基因时，操作过程中需要加热至90～95℃的目的是_______________。
(2)去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团，过程③对已开环的质粒两端去磷酸化的主要作用是_______；为使codA基因在受体细胞中表达，需要将其插在启动子之后，目的是_____________。
(3)过程④最常用的方法是_____________，过程⑤用到的细胞工程技术是_____________。codA基因能否在番茄细胞中稳定遗传的关键是______________________。
【答案】可以 目的基因受热变性解旋为单链 防止质粒自身环化 驱动codA基因（目的基因）的转录 农杆菌转化法 植物组织培养 codA基因（目的基因）是否插入到番茄的染色休DNA上
【解析】
基因工程的工具：限制酶、DNA连接酶、运载体。
基因工程的操作步骤：目的基因的获取；构建基因表达载体（含目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点）；把目的基因导入受体细胞（显微注射法、农杆菌转化法、钙离子处理法）；目的基因的检测和鉴定（分子水平检测—DNA分子杂交法、分子杂交法、抗原抗体杂交，个体水平的检测—抗虫抗病接种实验）。
图中：①逆转录、③构建基因表达载体、④把目的基因导入受体细胞、⑤植物组织培养。
（1）过程①获得的DNA片段是反转录形成的，不含内含子等序列，可以实现物种间的基因交流。采用PCR技术扩增codA基因时，加热至90～95℃是为了打开双链。
（2）过程③构建基因表达载体时，对已开环的质粒两端去磷酸化可以避免质粒自身环化；
启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，可以驱动目的基因的转录，故为使codA基因在受体细胞中表达，需要将其插在启动子之后。
（3）过程④把目的基因导入受体细胞最常用的方法是农杆菌转化法，过程⑤指植物组织培养。codA基因能否在番茄细胞中稳定遗传的关键是目的基因是否插入到受体细胞的染色体DNA上。
