题目内容
【题目】下图表示利用胚胎干细胞(简称ES细胞)所作的一系列研究，请据图分析回答下列问题：
（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸以及天然成分________等物质。
（2）过程Ⅱ表示将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育成________。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建________，需要的工具酶是________。
（4）克隆转基因小鼠常用的技术手段有________、细胞培养和________。
【答案】动物血清 发育的全能性 原肠胚 重组DNA(或重组载体) 限制酶、DNA连接酶 核移植 胚胎移植
【解析】
胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；功能上，具有发育的全能性，即可以分化成成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。
动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养条件；适宜的温度和pH；95%空气+5%二氧化碳的气体环境。
（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸，还需要加入血清、血浆等天然成分。
（2）胚胎干细胞具有发育的全能性，可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，故可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育，内细胞团表层的细胞形成外胚层，下方细胞形成内胚层，此时的胚胎叫原肠胚。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，需要用到限制酶和DNA连接酶。
（4）克隆转基因小鼠可以采用核移植技术，该过程会用到核移植、细胞培养和胚胎移植。
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