【题目】研究发现,紫外线辐射可使细胞产生活性氧和自由基,二者易发生一系列的氧化反应,产生的氧化产物对细胞造成伤害。有些水果的果皮中富含水溶性抗氧化剂。为此,有人对果皮所有成分能否保护细胞免受紫外线辐射伤害进行了探究。

实验材料与用具:适宜浓度的大肠杆菌菌液、柚皮提取液、葡萄皮提取液、无菌水、已灭菌的大肠杆菌培养基(装在培养皿中)、接种工具、紫外灯、恒温培养箱等。

实验步骤:

①取6个大肠杆菌培养基,编号a、b、c、d、e、f。

②按下表配方配制接种液,然后使用接种工具分别将菌种接种到6块培养基上。

培养基编号

接种液配方

a和d

3ml菌液

b和e

3ml菌液+1ml柚皮提取液

c和f

3ml菌液+1ml葡萄皮提取液

③紫外线照射:将a、b、c三个已接种的培养基置于紫外灯正下方10cm处照射3min,然后立即用铝箔纸包住培养皿,放入37℃恒温培养箱中培养;……

④24h后,取出培养皿,观察、计数。

实验结果:

分析讨论:

(1)实验步骤②的接种液配方有一处不完整,请补充:________。为提高本实验的可信度,还需要做________,避免偶然性对实验结果造成影响。

(2)在对a、b、c进行紫外灯照射时,对d、e、f的处理应该是________。本实验的自变量是________

(3)对实验结果的分析,可得出的初步结论是________

(4)在上述实验的基础上有人提出新探究课题:探究不同浓度果皮所含成分抵抗紫外线伤害细胞相关性研究。使用梯度平板法。其操作第一步:制备果皮成分浓度梯度平板,如下图所示。

培养基凝固并放置过夜。第二步:将3ml大肠杆菌菌液正确接种到该培养基表面。紫外线照射等其他步骤与上相同。

①制备的培养基凝固后需放置过夜的原因是:________

②现已证明,一定浓度的果皮成分对抵抗紫外线照射细胞的伤害呈正相关,下列三个培养结果,支持该结论的是:________。从进化的角度分析,培养皿上的菌落差异体现了紫外线对大肠杆菌种群进行了________选择。

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