题目内容
(15分)如图为利用生物技术获得生物新品种的过程示意图。据图回答:
(1)随着科技发展，获取目的基因的方法也越来越多，若乙图中的“抗虫基因”是利用甲图中的方法获取的，该方法称为 。图中①过程与细胞中DNA复制过程相比，该过程不需要 酶。③是在 (填“酶的名称”)作用下进行延伸的。
(2)在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanR)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。乙图为获得抗虫棉技术的流程。A过程需要的酶有 、 。图中将目的基因导入植物受体细胞采用的方法是 。C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 。
(3)离体棉花叶片组织经C、D、E成功地培育出了转基因抗虫植株，此过程涉及的细胞工程技术是 ，该技术的原理是 。
(4)检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用 与提取出的 做分子杂交。
(5)科学家将植物细胞培养得到 ，包上人工种皮，制成了神奇的人工种子，以便更好地大面积推广培养。
(15分)
(1)PCR技术（1分） DNA解旋（1分） 热稳定DNA聚合酶(Taq酶)（1分）
(2)限制酶（1分） DNA连接酶（1分） 农杆菌转化法（1分） 卡那霉素（1分）
(3)植物组织培养（1分） 细胞全能性（1分）
(4)标记的目的基因（2分） mRNA分子（2分）
(5)胚状体(或答“不定芽”“顶芽”“腋芽”等)（2分）
【解析】
试题分析：（1）图甲是利用目的基因作为模板在体外进行扩增的过程，即利用了PCR技术；图甲中①过程利用高温使DNA双链解旋，而DNA复制需DNA解旋酶才使双链解旋，故二者相比，该过程不需要DNA解旋酶；因是在高温环境中合成DNA，故所需的DNA聚合酶是热稳定性较高的Taq酶。
（2）图乙中A过程是获得重组质粒的过程，该过程需要用限制酶对质粒和目的基因进行切割，再在DNA连接酶的催化作用下形成重组质粒；因为导致的对象是植物细胞，而土壤农杆菌易侵染植物细胞，故一般用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞；C过程还需加入卡那霉素，目的是为了筛选导入重组质粒的受体细胞，因为只有导入重组质粒的受体细胞才能在卡那霉素的培养基中生存。
（3）将带有目的基因的植物细胞培育成植物需用到植物组织培养技术；该技术的原理是植物细胞具有全能性。
（4）因mRNA可以和目的基因模板链发生碱基互补配对，故可用标记的目的基因作探针对细胞中的mRNA进行检测，以确定目的基因是否转录。
（5）将培养到分化出不定芽的胚状体包上人工种皮，即可获得人工种子。
考点：本题考查转基因技术、植物组织培养技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。
2．(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：
(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________(写一种)。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。
(3)下面是两种培养基的配方：
表1：A培养基配方
| KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
| 1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10.0 g | 1.0 g | 15.0 g | 1 000 mL |
表2：B培养基配方
| 纤维素粉 | Na2HPO4· | NaNO37H2O | KH2PO4 | MgSO4·7H2O | KCl | 酵母粉膏 | H2O |
| 5 g | 1 g | 1.2 g | 0.9 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 1 000 mL |
①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。
a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌
②通常培养基采用____________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是________________________。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。
(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技术扩增，则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________，该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。
(5)在微生物培养过程中，常需要对微生物进行计数，血球计数板是常用的工具，血球计数板的计数室长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。
(6)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 ℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是( )
①甲菌产生了抗生素 ②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制 ③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 ④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长
A．①③ B．①④
C．②③ D．②④
2．(17分)(2012·南昌一模)尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：
(1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________(写一种)。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是______________________。
(3)下面是两种培养基的配方：
表1：A培养基配方
| KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
| 1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10.0 g | 1.0 g | 15.0 g | 1 000 mL |
表2：B培养基配方
| 纤维素粉 | Na2HPO4· | NaNO37H2O | KH2PO4 | MgSO4·7H2O | KCl | 酵母粉膏 | H2O |
| 5 g | 1 g | 1.2 g | 0.9 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 1 000 mL |
①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。
a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌
②通常培养基采用____________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是________________________。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。
(4)如果进一步从尿素分解菌中提取出DNA，利用PCR技术扩增，则每次循环复制可分为________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它们能合成________，该物质被提取出后的纯化方法通常是____________________________________________________。
(5)在微生物培养过程中，常需要对微生物进行计数，血球计数板是常用的工具，血球计数板的计数室长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的____________________。下图表示的是其中一个中方格的情况，对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是________个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个，则1 mL培养液中酵母菌的总数为________个。
(6)抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 ℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图A)，继续在同样条件下培养3天，结果如图B。分析结果，得出的结论是( )
①甲菌产生了抗生素 ②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制 ③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 ④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长
A．①③ B．①④
C．②③ D．②④
（9分）研究人员以某植物为材料，利用多套图甲装置，对影响光合作用的各种环境因素进行研究。
（1）在光合作用过程中，光反应为暗反应提供的两种物质是 。
（2）在温度、二氧化碳浓度等条件不变的情况下，将图甲装置由阳光下移至黑暗处，则植物叶肉细胞内三碳化合物含量, (增加、减少)。
（3）为了探究温度对光合作用的影响，首先应在图甲装置的烧杯内加入 溶液，然后再打开该装置的活塞开关，使U形管两侧液面如图所示，关闭活塞，这一操作的目的是 。实验的观察指标是U形管A侧液面的变化值。在每一给定温度且其它条件均相同、适宜的情况下光照1小时，实验数据如下表：
|
温度(℃) |
5 |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
35 |
|
水柱高度(mm/h) |
1.0 |
1.7 |
2.5 |
3.2 |
3.7 |
3.5 |
3.0 |
请根据以上数据在指定方框的坐标内以直方图的形式画出各温度下的实验结果 。
(２分)分析所绘图形可知温度与光合作用强度的关系是 。
（4）夏季去除图甲的水浴装置后，置于自然环境条件下，假定玻璃罩内植物的生理状态和自然环境中相同，且空气湿度对植物蒸腾作用的影响、微生物对CO2浓度影响均忽略不计，利用CO2浓度测定仪测定了该玻璃罩内一昼夜CO2浓度的变化情况，绘制成如图乙曲线。问图中CD段CO2浓度上升的原因是 ，曲线上植物光合作用速率等于呼吸作用速率的点是 。
