题目内容
【题目】PCR是一种快速扩增DNA的方法,用于放大特定的DNA片段,数小时内可使目的基因片段扩增数百万份。PCR技术需要模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸和DNA聚合酶等条件。请回答相关问题:
(1)PCR的全称是_______,是一种_____迅速扩增DNA片段的技术。该过程所需的酶具有______的特点。
(2)PCR的反应过程主要包括_____、_______、_____三个阶段,先用95℃高温处理的目的是______,而这一过程在细胞内是通过_______________________的催化实现的。
(3)DNA子链复制的方向是_____,这是由于DNA聚合酶只能从引物的______端开始连接单个脱氧核苷酸分子。
(4)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种单链DNA或RNA分子。请在图中绘出引物结合的位置。
_______
【答案】多聚酶链式反应 体外 热稳定性高(耐高温) 变性 复性 延伸 使DNA解旋为单链 DNA解旋酶 从5’端到3’端 3’端
【解析】
PCR的原理是DNA双链复制,利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸,以便根据这一序列合成引物。向PCR反应体系中除了要加入两种引物外还要加入DNA模板、耐热的DNA聚合酶、四种脱氧核糖核酸。PCR反应每轮循环需经过变性、复性、延伸三步。
(1)PCR的全称是多聚酶链式反应。是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。在PCR技术中需用95℃高温处理使DNA解旋,而高温会使一般的DNA聚合酶变性失活,所以该过程所需的酶具有热稳定性高的特点。
(2)PCR的反应过程主要包括变性、复性、延伸三个阶段,在PCR技术中先用95℃高温下处理的目的是使DNA变性,使DNA解旋为单链,而这一过程在细胞内是通过解旋酶的催化实现的。
(3)引物通常是一种单链DNA,它能与解开的DNA母链的3端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点,使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是从5端到3端。
(4)引物可与DNA母链的一段碱基序列互补配对,由于DNA的两条链为反向螺旋,所以引物结合的位置:。