题目内容
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题:
试管编号 项目 | I | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | V | Ⅵ |
蒸馏水(mL) | 2 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 |
缓冲液(mL) | 0 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
果胶酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0.5 | 0 | 0 |
蜗牛酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.5 | 0 |
纤维素酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.5 |
实验结果(绿色深浅程度) | - | - | - - | +++ | ++++ | ++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)
(1)实验中加入缓冲液的作用是__________。
(2)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用__________渗溶液洗涤。
(3)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有__________等多种酶。该实验中________是空白对照组,其设置意义是______________________。
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,如何检验?_____________________________。
(12分,每空2分)
(1)维持反应液中的PH的稳定(其他合理答案也给分) (2)等
(3)果胶酶和纤维素酶 I、II、III 排除无关变量的干扰
(4) 把原生质体放入低渗溶液(或蒸馏水)中,如果破裂说明原生质体制备成功(其他合理答案也给分)
研究人员为了制备烟草(四倍体,4n=48)的叶片细胞与紫罗兰(二倍体,2n=14)的紫色花瓣细胞的原生质体,并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株,进行了如下实验:
一、原生质体的制备
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号 项目 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | V | Ⅵ |
蒸馏水(mL) | 2 | 0 | 1 | 1 | 1 | 1 |
缓冲液(mL) | 0 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
果胶酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0.5 | 0 | 0 |
蜗牛酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.5 | 0 |
纤维素酶液(mL) | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.5 |
实验结果(绿色深浅程度) | — | — | — | + + + | + + + + | + + |
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题:
试管编号 项目 |
I |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
V |
Ⅵ |
蒸馏水(mL) |
2 |
O |
1 |
1 |
1 |
1 |
缓冲液(mL) |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
果胶酶液(mL) |
O |
0 |
O |
0.5 |
O |
0 |
蜗牛酶液(mL) |
O |
0 |
O |
O |
0.5 |
0 |
纤维素酶液(mL) |
0 |
O |
0 |
O |
0 |
0.5 |
实验结果(绿色深浅程度) |
- |
- |
- - |
+++ |
++++ |
++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“-”表示颜色无显著变化)
(1)加入酶液后要轻摇试管的目的是__________。
(2)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用__________洗涤。
(3)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有__________等多种酶。该实验中________是空白对照组,其设置意义是______________________。
(4)收集的原生质体是否符合要求还需进行检验,如何检验?_____________。
去除细胞壁的植物细胞称为原生质体。酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号 项目 |
I
|
Ⅱ
|
Ⅲ
|
Ⅳ
|
V
|
Ⅵ
|
蒸馏水(mL) |
2 |
O |
1 |
1 |
1 |
1 |
缓冲液(mL) |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
果胶酶液(mL) |
O |
0 |
O |
0.5 |
O |
0 |
蜗牛酶液(mL) |
O |
0 |
O |
O |
0.5 |
0 |
纤维素酶液(mL) |
0 |
O |
0 |
O |
0 |
0.5 |
实验结果(绿色深浅程度) |
- |
- |
- |
+++ |
++++ |
++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组,其设置意义是 。
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 洗涤。