Question

【题目】泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的食品，鲜嫩清脆、风味可口，可以增进食欲，帮助消化与吸收，但是腌制食品含有较多的亚硝酸盐，因此应尽量少吃腌制食品，多吃新鲜蔬菜。

回答下列有关生物技术的问题：

（1）膳食中的绝大部分亚硝酸盐在人体内以“过客”的形式随尿排出，只有在适宜的pH、温度和一定的_______________作用下，才会转变成致癌物亚硝胺。测定泡菜中亚硝酸盐的含量常采用______________法。

（2）大规模生产优质泡菜时，需先获得大量优质的乳酸菌种，若要从陈泡菜水中分离、纯化乳酸菌单菌落需在液体培养基中加入________________（填物质名称）。将获得的乳酸菌单菌落在适宜的液体培养基中大量培养，通过______________法计数培养液中的活菌时，每隔24h统计1次菌落数目，应选取菌落数目______________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

（3）乳酸菌进行乳酸发酵时，首先将糖类转化为丙酮酸，再在乳酸脱氢酶的参与下将丙酮酸转化为乳酸。若要从乳酸菌中分离、纯化获得乳酸脱氢酶，可采用______________法，该方法分离蛋白质的依据是_____________________________。判断上述方法纯化的蛋白质是否达到要求，还需要进行蛋白质纯度的鉴定，在鉴定的方法中，使用最多的是______________。

Answer 1

【答案】微生物 比色 凝固剂（或琼脂） 稀释涂布平板 稳定 凝胶色谱（或分配色谱） 相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶的速度不同，从而将大小不同的蛋白质分开 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

【解析】

泡菜主要是靠乳酸菌的发酵生成大量乳酸而不是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的。泡菜使用低浓度的盐水，或用少量食盐来腌渍各种鲜嫩的蔬菜，再经乳酸菌发酵，制成一种带酸味的腌制品，只要乳酸含量达到一定的浓度，并使产品隔绝空气，就可以达到久贮的目的。

（1）亚硝酸盐是亚硝胺类化合物的前体物质。在自然界中，亚硝酸盐极易与胺化合，生成亚硝胺。在人体胃的酸性环境中，亚硝酸盐也可以转化为亚硝胺。测定泡菜中亚硝酸盐的含量常采用比色法。

（2）通常是细菌在固体培养基上（内）生长发育，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞的集团，称之为菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法。应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

（3）凝胶色谱（或分配色谱）法是分离蛋白质常用的方法。该方法分离蛋白质的依据是分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术，用于分离蛋白质和寡核苷酸。