题目内容
【题目】P115蛋白是高尔基体上重要的囊泡转运蛋白，与胃癌细胞增殖有关。为进一步确定P115与胃癌细胞增殖的关系，研究人员展开系列实验。
（1）与P115蛋白合成和加工密切相关的细胞器有_________，P115蛋白的_________与其作用密切相关。
（2）分别收集100mg新鲜胃癌组织及正常粘膜组织，检测其中P115蛋白含量，两组相对值分别为0．75和0．35，由此推测胃癌细胞中_________。进一步分别提取总RNA，测得P115的mRNA相对值分别为0．7和0．5，初步证实上述推测是合理的。
（3）为研究P115在胃癌细胞株增殖中的作用，研究人员构建了含有P115-shRNA的表达载体（P115-shRNA可使相应基因沉默），导入胃癌细胞株BGC-823，成功转染（真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。从本质上讲，和转化相似）后检测各组P115蛋白含量，结果如下图。
①上图中1、2组为对照组，1组不导入质粒，2组_________，3、4、5组分别导入含P115-shRNAl、P115-shRNA2、P115-shRNA3的表达载体。
②—actin是一种细胞骨架蛋白，可以在实验中作为参考标准的原因是_________。
③选择上图中的第_________组作为实验组，进一步测定不同培养时间各组细胞数相对值，结果如下表。
分组 培养时间 | 1组 | 2组 | 实验组 |
0h | 0．285 | 0．283 | 0．284 |
24h | 0．453 | 0．454 | 0．384 |
48h | 0．675 | 0．678 | 0．466 |
72h | 0．981 | 0．991 | 0．605 |
此结果说明P115蛋白_________。
④测定上述第1、2组和实验组处于细胞周期各时期细胞数，结果如图。
由图可知P115-shRNA通过_________来抑制癌细胞BGC-823增殖。
（4）结合上述研究，提出治疗胃癌的思路_________。
【答案】核糖体、内质网、线粒体、高尔基体 空间结构/结构 P115蛋白基因转录（或表达）水平高于胃粘膜组织 导入空质粒 在各细胞内稳定表达 4 能促进胃癌细胞株BGC-823细胞增殖 阻滞细胞从G1进入S期（或阻止DNA复制，或将细胞阻滞在G1期） 降低p115蛋白的含量；使p115蛋白的基因沉默；抑制p115蛋白基因的表达；使用能够抵消p115蛋白作用的药物；使用能够阻止胃癌细胞进入S期的药物
【解析】
1、分泌蛋白的合成和分泌过程：在核糖体上氨基酸脱水缩合形成肽链，肽链依次进入内质网、高尔基体进行加工、分类和包装，由囊泡运输到细胞膜，由细胞膜分泌到细胞外，该过程需要的能量由线粒体提供。
2、细胞癌变的原因：原癌基因和抑癌基因发生突变，导致细胞称为不受机体控制、能无限增殖的癌细胞，诱发细胞癌变的因子：物理致癌因子、化学致癌因子、病毒致癌因子。
（1）与分泌蛋白合成和分泌有关的细胞器是核糖体、内质网、高尔基体、线粒体；蛋白质空间结构与功能密切相关。
（2）由题意，相同体积的新鲜胃癌组织及正常胃粘膜组织，P115蛋白含量新鲜胃癌组织高于正常胃粘膜组织，因此可以推测胃癌细胞中P115蛋白基因转录（或表达）水平高于正常胃粘膜组织。
（3）①由题意知，3、4、5组分别导入含有P115-shRNA1、P115-shRNA2、P115-shRNA3的表达载体的实验组，1、2组为对照组，1组不导入质粒，2组导入的应该是空质粒。
②β-actin是一种细胞骨架蛋白，细胞骨架在所有动物细胞中存在，即其基因在各细胞内稳定表达，因此可以在实验中作为参考标准。
③由题意知，P115-shRNA可使相应基因沉默，从图可知，4组P115最少，因此进一步测定不同培养时间各组细胞数量相对值，4组可以作为实验组；由表格信息可知，实验组细胞数目少于对照组，而实验组加入P115-shRNA1、P115-shRNA2、P115-shRNA3的表达载体，而P115-shRNA可使P115基因沉默，因此说明P115能促进胃癌细胞株BGC-823细胞增殖。
④由柱形图可知，实验组与对照组相比，S期细胞数目比例较小，因此P115-shRNA通过抑制DNA分子复制来抑制胃癌细胞BGC-823增殖。
（4）由题图研究可以推测，治疗胃癌的思路是：降低P115蛋白的含量；使P115蛋白的基因沉默；抑制P115蛋白基因的表；使用能够抵消P115蛋白作用的药物；使用能够阻止胃癌细胞进入S期的药物。
