Question

【题目】回答下列有关动物细胞培养的问题：

（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是______________。

（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成不死性细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量________。

（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是___________________________________________________________________。

（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

（5）在细胞培养过程中，通常在________条件下保存细胞。

Answer 1

【答案】

（1）接触抑制 单层（或一层）

（2）衰老甚至死亡 降低 减少

（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色

（4）中

（5）冷冻（或超低温、液氮）

【解析】

（1）细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖．由于接触抑制，动物细胞培养时，瓶壁上只能形成的单层细胞．可以用胰蛋白酶处理使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来．

（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡现象，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成不死性细胞，该种细胞的细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）减少，细胞的黏着性降低．

（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，所以用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不能被染色．

（4）有丝分裂中期，细胞中染色体形态固定、数目清晰，是观察染色体的最佳时期．所以检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜进行观察．

（5）在细胞培养过程中，通常在冷冻（或超低温、液氮）条件下保存细胞．因为在这种条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低．