题目内容

【题目】动物细胞培养技术有很多用途,如生产分泌性蛋白药物、检测有毒物质、获得大量自身健康细胞等。某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。请根据下列有关动物细胞培养实验回答相关问题:

1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是______________

2)随着细胞分裂增殖次数的增多,绝大部分细胞停止分裂,极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成特殊细胞,该种细胞的结构特点为________________________________

3)实验中可以通过观察细胞的畸变率来确定物质毒性的大小。某有机物X,其毒性可诱发染色体断裂。利用下图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。

材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。实验过程如下:

①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。

②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“”表示已完成的步骤)。

步骤一:加入肝脏培养液

步骤二:加入有机物X溶液

步骤三:放置肝脏小块

上表中的步骤还未完成,还需进行的操作是_______________________________

③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片,在显微镜下观察_____________________,并对比分析,最好选用细胞分裂到________期时进行观察。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明__________________________________

【答案】人们对细胞所需营养物质成分不明确,血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 变为球形,细胞膜表面糖蛋白的量减少 向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 肝脏小块对有机物X具有解毒作用

【解析】

1、动物细胞培养的过程:取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中(原代培养)放入二氧化碳培养箱培养贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞,制成细胞悬液转入培养液(传代培养)放入二氧化碳培养箱培养。

2、动物细胞培养的条件:

1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物;

2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质;

3)温度和pH

4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%CO2(维持培养液的pH

1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是人们对细胞所需营养物质成分不明确,血清可以补充合成培养基中缺乏的物质。

2)随着细胞分裂增殖次数的增多,绝大部分细胞停止分裂,极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成特殊细胞,该种细胞的结构特点为变为球形,细胞膜表面糖蛋白的量减少。

3)②为了排除是肝脏培养液或是肝脏小块对实验的影响,应向乙或丁装置中放置肝脏小块。

④有机物X有毒性,可诱发染色体断裂,所以一段时间后要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化;有丝分裂中期染色体的形态和数目比较清晰,所以最好选用细胞分裂的中期时进行观察;甲组添加肝脏小块,淋巴细胞染色体正常,丙组没有添加,出现染色体异常,说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用。

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