Question

【题目】硫酸化酶RaxST（胞外酶）是当前研究的热点，现将该酶的基因通过基因工程的方式导入到大肠杆菌体内。已知大肠杆菌在表达蛋白质时，与培养时IPTG诱导剂浓度有关。为研究培养时诱导剂浓度对硫酸化酶表达量的影响，请根据以下提供的实验材料写出实验思路：

实验材料：若干培养瓶，培养液，转基因的大肠杆菌，IPTG粉末

（要求与说明：①实验仪器、试剂、用具及操作方式不作要求；②实验条件适宜；）

请回答：

（1）实验思路：①………

实验结果：实验后发现，三组中，IPTG诱导浓度为中的这组，诱导后所得RaxST酶浓度高于IPTG浓度为高的和低的这两组。

（2）根据（1）的思路和结果，请用曲线图来体现这一结果。______

（3）该实验中，转基因技术所涉及的变异原理是______ 。

（4）大肠杆菌生产得到的硫酸化酶RaxST（胞外酶）___________是/否）具有生物活性。

Answer 1

【答案】1、取等量培养液放置于三个培养瓶中，编号ABC

2、分别在ABC三个瓶中分别加入较少量、中量和较多量的IPTG粉末，振荡摇匀

3、取大肠杆菌稀释后，分别等量接种于ABC三个瓶中，于适宜条件下培养

4、每隔相同的时间测定三组中的硫酸化酶浓度并记录

5、对实验数据进行统计分析 基因重组 否

【解析】

据题意可知，该实验的目的是研究培养时诱导剂浓度对硫酸化酶表达量的影响，按照按照单一变量原则设计实验即可。

（1）该实验为研究培养大肠杆菌时诱导剂浓度对硫酸化酶表达量的影响，实验自变量为诱导剂浓度，因变量为硫酸化酶表达量，即硫酸化酶浓度，除诱导剂浓度外，其他条件应相同且适宜。每隔相同的时间，测定硫酸化酶浓度，并且记录。最后对统计的全部数据进行处理，绘制曲线。故具体实验思路为：

1、取等量培养液放置于三个培养瓶中，编号A、B、C；

2、分别在A、B、C三个瓶中分别加入较少量、中量和较多量的IPTG粉末，振荡摇匀；

3、取大肠杆菌稀释后，分别等量接种于A、B、C三个瓶中，于适宜条件下培养；

4、每隔相同的时间测定三组中的硫酸化酶浓度并记录；

5、对实验数据进行统计分析。

（2）由于实验结果未： IPTG诱导浓度为中的这组，诱导后所得RaxST酶浓度高于IPTG浓度为高的和低的这两组，所以可绘图如下：

（3）转基因技术的原理是基因重组。

（4）硫酸化酶RaxST是胞外酶，需要通过内质网和高尔基体的加工才具有生物活性，而大肠杆菌为原核生物，没有内质网和高尔基体，所以在大肠杆菌内合成的硫酸化酶RaxST没有生物活性。