Question

【题目】酵母菌是发酵工程常用的微生物，在日常生活中也有广泛应用。某兴趣小组为了研究酵母菌种群数量的变化规律，进行了相关研究实验，图1为实验流程，图2为根据实验测得数据绘制的曲线图。请据图回答：

(1)摇床又称为自动振荡器，培养时需将锥形瓶置于摇床上进行震荡的目的是______________

(2)若本实验使用的是如下规格的血球计数板，左下是一块血球计数板正面示意图，右下为计数板规格图，该血球计数板上有________个计数室，在计数时一般采用_____________法进行取样计数。若制备装片时，将清洁干燥的血球计数板先在计数室上滴一滴酵母菌液，静置5 min再盖上盖玻片，测量的结果会_____________。

(3)显微观察时在调焦清楚后，若发现只能看到血球计数板的横线而看不到竖线，此时应____

(4)显微计数时发现所选取的样方中方格内酵母菌总数为零，可能的原因有(多选)（______）

A. 样液中酵母菌数量过少

B. 样液稀释的倍数过大

C. 样液取自于未摇匀的上清液

D. 实验过程中部分酵母菌死亡

(5)分析图2实验数据得知，在0～7 d之间酵母菌的数量呈________增长：超过7d之后，由于_________________________________________________原因，酵母菌种群数量呈下降趋势。

Answer 1

【答案】摇晃震动可以增加培养液中的溶氧量，利于酵母菌和反应底物的充分结合 2 五点取样 偏高 调节反光镜和光圈，将视野调暗 ABC “S型” 营养物质的大量消耗、代谢废物的积累、培养液pH的变化

【解析】

探究培养液中酵母菌数量的动态变化的实验原理：
（1）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。
（2）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。

(1) 摇床又称为自动振荡器，培养时需将锥形瓶置于摇床上进行震荡的目的是摇晃震动可以增加培养液中的溶氧量，利于酵母菌和反应底物的充分结合。

(2) 由图可知该血球计数板上有2个计数室，在计数时一般采用五点取样法进行取样计数。先将培养液滴加到血球计数板的计数室中再盖上盖玻片计数，由于已加入的液滴的表面张力作用使其未能严密的盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大，从而使计数结果偏高。故制备装片时，应先盖盖玻片再滴培养液。

(3) 显微观察时在调焦清楚后，若发现只能看到血球计数板的横线而看不到竖线，说明对光不准确，此时应该调节反光镜和光圈，将视野调暗。

（4）显微计数时发现所选取的样方中方格内酵母菌总数为零，可能的原因有：样液中酵母菌数量过少、样液稀释的倍数过大、样液取自于未摇匀的上清液；而实验过程中部分酵母菌死亡，死亡的酵母菌仍然存在于视野中，不会出现视野中酵母菌总数为0，故ABC符合题意，D不符合题意。

(5) 分析图2实验数据得知，在0～7d之间酵母菌的数量呈“S型”增长；超过7d之后，由于营养物质的大量消耗、代谢废物的积累、培养液pH的变化原因，酵母菌种群数量呈下降趋势。