Question

【题目】胰岛素分泌主要受血糖水平调节，也受胰岛a细胞分泌物等其他因素影响．胰岛素瘤细胞（简称INS﹣1细胞），具备分裂和分泌胰岛素能力．为探究不同比例的胰岛a细胞培养上清液对INS﹣1分裂和分泌胰岛素的影响，请根据所给的实验材料完成如下实验．

实验材料：INS﹣1细胞、含不同比例的胰岛a细胞培养上清液（0%、10%、30%、100%）的培养液、20mmol/L的葡萄糖溶液，显微镜，培养瓶，胰蛋白酶，血细胞计数板等．（要求与说明：胰岛素含量测定及细胞计数的具体操作不作要求；培养过程中不更换 培养液；培养液成分变化不利于细胞生长不作要求；实验条件适宜）

请回答：

（1）实验思路：_______

（2）设计一份实验结果记录表．_________．

Answer 1

【答案】①取INS﹣1细胞，经胰蛋白酶处理后得到细胞悬浮液，在显微镜下用细胞计数板进行计数，并记录．②取培养瓶若干个，平均分成4组并编号，分别加入等量的INS﹣1细胞、等量的不同比例的胰岛a细胞培养上清液和等量且适量的20mmol/L的葡萄糖溶液．每组设置重复样品若干．③将上述四组样品培养一段时间后，分别取上述四组中的培养瓶内的细胞悬浮液，在显微镜下用学细胞计数板分别进行计数，计算平均值并记录；收集上清液，测定胰岛素含量，计算平均值并记录．④对实验数据进行分析与处理

溶液	胰岛素含量（mg/100ml）				细胞数（个）
	样品1	样品2	样品3	平均值	样品1	样品2	样品3	平均值
0%的胰岛a细胞培养上清液
10%的胰岛a细胞培养上清液
30%的胰岛a细胞培养上清液
100%的胰岛a细胞培养上清液

【解析】

实验思路和结果分析都要牢牢把握实验目的，该实验的目的是探究不同比例的胰岛a细胞培养上清液对INS-1分裂和分泌胰岛素的影响，所以要配置不同比例的胰岛a细胞培养上清液，一般设定4组不同比例即可，其他一切因素要保证相同。

(1)实验思路：

总体先梳理思路：该实验的目的是探究不同比例的胰岛a细胞培养上清液对INS-1分裂和分泌胰岛素的影响，所以要配置不同比例的胰岛a细胞培养上清液，一般设定4组不同比例即可，其他一切因素要保证相同。

具体步骤：首先取INS－1细胞，经胰蛋白酶处理后得到细胞悬浮液，在显微镜下用细胞计数板进行计数，并记录。然后分组培养时，平均分成4组并编号，分别加入等量的INS－1细胞、等量的不同比例的胰岛a细胞培养上清液和等量且适量的20 mmol/L的葡萄糖溶液。每组设置重复样品若干（设置为3个）。培养一段时间后，分别取上述四组中的培养瓶内的细胞悬浮液，在显微镜下用血细胞计数板分别进行计数，计算平均值并记录；收集上清液，测定胰岛素含量，计算平均值并记录。最后对实验数据进行分析与处理。

(2)由于该实验的目的是探究不同比例的胰岛a细胞培养上清液对INS-1分裂和分泌胰岛素的影响，因此实验结果记录表应包含：不同比例的胰岛a细胞培养上清液共4组，每组3个平行，及其所对应的实验结果：胰岛素含量（mg/100ml）和细胞数（个），据此设计下表：

溶液	胰岛素含量（mg/100ml）				细胞数（个）
	样品1	样品2	样品3	平均值	样品1	样品2	样品3	平均值
0%的胰岛a细胞培养上清液
10%的胰岛a细胞培养上清液
30%的胰岛a细胞培养上清液
100%的胰岛a细胞培养上清液