题目内容
【题目】胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向诱导人
羊膜间充质干细胞(hAMSCs)分化成胰岛B细胞。回答问题:
(1)取人羊膜组织刮除血块的上皮细胞,冲洗后剪碎,然后用 处理,最终制
成hAMSCs悬液,将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养,当细胞帖壁生长到一定阶段时,出现
现象,此时细胞停止分裂增殖,这时需要将细胞进行相关处理,然后进行传代培养。
取传至第3带的hAMSCs放入细胞培养板,同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能
(2)保持细胞正常的 。诱导分化培养15天后,提取细胞 ,用胰岛素基因探针进行分子杂交,可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。
(3)hAMSCs细胞在RPE作用下,可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的细胞,其根本原因
是 。培养hAMSCs细胞的培养液中营养成分包括 (至少写两种)
人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥,目前临床通过使用 抑制T
细胞的增殖来提高器官移植的成活率。
【答案】
(1)胰蛋白酶 接触抑制
(2)核型 mRNA
(3)基因选择性表达 糖、氨基酸、无机盐、血清
(4)免疫抑制剂
【解析】
(1)要制成细胞悬液应用胰蛋白酶或胶原蛋白梅处理。细胞贴壁生长到一定阶段时,会出现接触抑制的现象,细胞增殖会停止。
(2)在10代之内的一般都能保持正常的细胞核型。因为是检测是否分化成胰岛B细胞,所以应提取mRNA,在胰岛B细胞中有特有的mRNA。
(3)细胞分化的根本原因是基因的选择性表达,动物细胞培养液中的营养成分包括糖类、氨基酸、无机盐还有天然成分血清或血浆。
(4)对于抑制T细胞的增殖可以使用免疫抑制剂,从而减弱细胞免疫来提高器官移植的成活率。
动物细胞培养 | 动物体细胞核移植 | |
原理 | 细胞增殖 | 动物细胞核的全能性 |
过程 | ||
结果 | 获得细胞群 | 获得克隆动物 |
应用 | ①生产生物制品 ②用于基因工程 ③检测有毒物质 | ①加速家畜遗传改良进程,促进良种繁育 ②保护濒危物种 ③生产医用蛋白 ④提供克隆器官、组织等 |