Question

【题目】高浓度酒精会抑制酵母菌活性，因而在米酒制作中，要筛选耐酒精能力较强和发酵性能优良的酵母菌。某实验小组进行了如下实验：

（1）准备：1酵母菌在-20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的____________（氯化钙、蒸馏水或甘油）

2为了解发酵液中酵母菌的数量，可采用_______________法接种。若1mL发酵液稀释105倍，在三个平板上分别接入0.2mL稀释液，经适当培养后，三个平板上的菌落数分别为33、38、37，则1mL发酵液中有__________个酵母菌。

（2）原理：由于酵母菌在酒精发酵中产生_________，随着发酵时间的延续，瓶重逐渐减轻。

（3）步骤：1 将等量的三种品系酵母菌分别接种在_________浓度为6%、8%、10%、12%的等量液体培养基中。

2 在相同且适宜条件下密闭发酵。

3 每天相同时间，轻轻摇晃瓶子后，____________，并称重发酵瓶。

（4）结果分析：在某浓度下，小组测定实验结果如图所示。

根据图示，则Y1比Y3更适合作为生产米酒的菌种。理由是________________。

Answer 1

【答案】 甘油 稀释涂布平板 1.8×107 CO2 酒精 拧松瓶盖(或放气) Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（产生CO2的量/发酵速率/发酵能力）大于Y3（Y3前期发酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力强

【解析】试题分析：菌种长期保存应采用甘油管藏法，保存在-20℃的环境中。为了分离、纯化和计数酵母菌，常常采用稀释涂布平板法进行接种培养，等到平板上形成稳定的菌落后，然后选取菌落数范围落在30—300个的稀释倍数作为估算的数据，进行求平均值。为了筛选耐酒精能力较强和发酵性能优良的酵母菌，应将不同品系的酵母菌接种在不同酒精浓度的培养液中，依据酵母菌在酒精发酵中产生CO2而导致培养液质量减轻的多少为指标，推测不同品系的酵母菌的耐酒能力和发酵性能。分析实验结果的三条曲线可知，Y1和Y2都比Y3耐酒能力强且发酵性能好；并且Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（产生CO2的量/发酵速率/发酵能力）大于Y3（Y3前期发酵能力不如Y1），所以Y1耐酒精能力最强。

（1）根据前面的分析可知，长期保藏菌种的试管内应加甘油，一方面防止外来杂菌干扰，另一方面隔绝空气。

（2）根据前面的分析可知，分离计数培养液中菌体数量，应选用稀释涂布平板法接种。根据题意，1mL发酵液中有（33+38+37）÷3÷0.2×105=1.8×107个酵母菌。

（3）为了筛选耐酒精能力较强和发酵性能优良的酵母菌，依据的原理是酵母菌在酒精发酵中产生CO2逐步释放，所以随着发酵时间的延续，瓶重逐渐减轻。

（4）本实验的思路：将等量的三种品系酵母菌分别接种在不同酒精浓度的等量液体培养基中，放在相同且适宜条件下密闭发酵，每天相同时间，轻轻摇晃瓶子后，拧松瓶盖释放CO2气体，并称重发酵瓶。分析实验结果，Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（产生CO2的量/发酵速率/发酵能力）大于Y3（Y3前期发酵能力不如Y1），由于Y1比Y3更适合作为生产米酒的菌种。