[题目]基因检测是指通过检测生物体中的DNA序列.以了解生物体基因状况的技术手段.Sanger双脱氧链终止法是DNA测序的基本方法.其原理是:核酸模板在核酸聚合酶.带有3′-OH末端的单链核苷酸引物.四种dNTP存在的条件下复制或转录时.如果在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP(即2.3双脱氧核苷三磷酸.在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基.故不能同后续� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

【题目】基因检测是指通过检测生物体中的DNA序列，以了解生物体基因状况的技术手段。Sanger双脱氧链终止法是DNA测序的基本方法，其原理是:核酸模板在核酸聚合酶、带有3′-OH末端的单链核苷酸引物、四种dNTP存在的条件下复制或转录时，如果在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键），只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长，链端掺入dNTP的片段可继续延长。通过电泳将不同长度的片段分开，DNA片段越小，距离起点越远，根据末端核苷酸可得到原始序列信息。具体流程图如下。

（1）若待测核酸模板为双链DNA，首先要作____________处理，与引物结合后，在DNA聚合酶作用下子链沿____________方向（填“5′端向3′端”或“3′端向5′端”）进行延伸反应。若待测核酸模板为RNA，则需要在____________酶的帮助下合成DNA单链片段。

（2）ddNTP为2，3-双脱氧核苷三磷酸，只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长的原因是____________。

（3）假设某反应体系中，待测DNA单链序列3′GTACCGTA5′，加入4种dNTP和ddATP，经过双脱氧链终止法处理，会得到____________种片段，其中最短的片段序列是____________。

（4）假设某次Sanger双脱氧链终止法测序得到的电泳图如上图所示，则待测DNA序列从5′端到3′端为____________。

【答案】变性从5′端向3′端逆转录酶 3号碳上不是羟基，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键 3 CddA ATGGTCATCA

【解析】

读取信息“在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键），只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长，链端掺入dNTP的片段可继续延长”“DNA片段越小，距离起点越远，根据末端核苷酸可得到原始序列信息”进行解答。

（1）测定双链DNA的序列需要将DNA进行变性处理，获得单链DNA分子；由于引物是3′-OH末端的单链核苷酸，所以子链沿着5′端向3′端进行延伸反应；利用RNA获得DNA单链的过程是逆转录，所以需要逆转录酶。

（2）根据题干信息，ddNTP为2，3-双脱氧核苷三磷酸其3号碳上不是羟基，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键，所以只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长。

（3）ddATP带有碱基腺嘌呤，和胸腺嘧啶配对，从5′端向3′端延伸，由于待测序列含有2个胸腺嘧啶，所以可以获得5′CddA3′，5′CATGGCddA3′，5′CATGGCAT3′共3种片段，最短的序列是CddA。

（4）根据题干信息“DNA片段越小，距离起点越远，根据末端核苷酸可得到原始序列信息”根据电泳序列，使用ddT获得了3个片段，其中有最小的和最大片段，因此该DNA序列的第一个和最后一个碱基都是A；按照碱基互补配对的原则，获得序列ATGGTCATCA。

练习册系列答案

物种	I	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ
生物量（g·m-2）	134	321	35	175

A.该生态系统的结构在图1中还缺少非生物的物质和能量

B.图1涉及的营养级共4个，其中第1营养级到第2营养级的传递效率约为10.7%

C.从表可知，该生态系统的优势种最可能为Ⅱ，因为它的生物量最多

D.表中的四种生物的种间关系可能为竞争，也可能为捕食

【题目】下图为两种独立遗传的单基因遗传病甲、乙的家系图，甲病由等位基因B、b控制，乙病由等位基因D、d控制。已知女性群体中乙病的发病率为1/169。

下列叙述正确的是（）

A.甲病和乙病的性状遗传可能均与性别相联系

B.Ⅱ6的乙病致病基因来自于Ⅰ4

C.Ⅱ1与Ⅱ3基因型相同的概率为1/2或8/21

D.若Ⅰ3不携带b基因，则Ⅲ1与和Ⅲ2婚配生育一个女孩，同时患两种病的孩子的概率为1/28或1/52

【题目】已知DNA复制时，子链的延伸方向是5'→3'，下图1. 2. 3、4为四种单链DNA片段。使用PCR技术扩增人胸腺素基因时，可选择的引物和该过程所需要的酶分别是（）

A.1和4、Taq酶

B.2和3、Taq酶

C.1和4、DNA连接酶

D.2和3、DNA连接酶

【题目】很多植物体内只有一条固定CO2的途径，即卡尔文循环，也称为C3途径，这样的植物被称为C3植物；还有一些植物如玉米、甘蔗除了具有C3途径外，还有另外一条固定CO2的途径，即C4途径，这样的植物被称为C4植物，如下图所示。C4途径起到了“CO2泵”的作用，能将叶肉细胞周围低浓度的CO2聚集到维管束鞘细胞叶绿体内形成高浓度的CO2进行高效的光合作用。C3植物叶肉细胞含有大量叶绿体，维管束鞘细胞不含叶绿体；C4植物叶肉细胞有正常的叶绿体，维管束鞘细胞含有没有基粒的叶绿体，进行光合作用时叶肉细胞叶绿体内无淀粉合成，维管束鞘细胞叶绿体内有大量淀粉合成。请回答下列问题：

（1）C3植物和C4植物体内固定CO2的物质分别是________________、____________。C3植物和C4植物叶片内进行光合作用的细胞分别是____________、____________。

（2）研究发现，C4途径固定CO2的酶比C3途径固定CO2的酶对CO2的亲和力高60多倍，据此推测C3植物和C4植物比较，CO2补偿点较低的是____________，中午因温度较高气孔关闭，对光合作用影响较小的是____________。

（3）将C3植物和C4植物黑暗处理24小时，再进行一小段时间的光照，经脱色处理后，再用碘液对C3植物和C4植物的叶肉细胞和维管束鞘细胞染色，出现蓝色的细胞有____________。

【题目】干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血液中只能提取0.5μg,所以价格昂贵。某生物制品公司用如下图的方式生产干扰素。请回答下列有关问题:

(1)若要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素，需构建基因表达载体，将基因表达载体导入受精卵最有效的方法是________。

(2)通常情况下，对供体和受体母牛选择后，要用激素进行________处理。

(3)为了实现干扰素的批量生产，对移植前的胚胎需进行性别鉴定。目前SRY-PCR 法是性别鉴定最有效、最准确的方法。操作的基本程序是从被测的囊胚中取出几个________细胞，提取DNA:然后用位于Y染色体上的性别决定基因(即SRY基因)的一段碱基序列作________，用被测胚胎DNA作模板进行PCR扩增;最后选择出现_________反应 (填 “阳性”或“阴性")的胚胎进行移植。