题目内容
现有一长度为1000个碱基对的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000个碱基对，用Kpn1单独酶切得到400个碱基对和600个碱基对两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200个碱基对和600个碱基对两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是
D
【解析】用限制性核酸内切酶EcoR1酶切后得到的DNA分子仍是1000 bp”。因为虽然本题EcoR1酶的酶切位点正好在一端，但限制酶识别的是一段脱氧核苷酸序列，所以只要限制酶切了，就一定会切下一小段核苷酸，除非它没切。通常认为：“链状的切一刀就变两段”是对的。所以D选项正确。
口算题卡北京妇女儿童出版社系列答案肺细胞中的let一7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let一7基因导入肺癌细胞实现表达增强后，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。
(1)进行过程①时，需用 酶切开载体以插入let一7基因。进行过程②时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于 细胞培养。采用PCR技术扩增let一7基因时，在PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高温的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等，若在该反应体系中，目的基因扩增了5代，则具有引物I的DNA所占的比例理论上为 。
(2)研究发现，let一7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取 进行分子杂交，以直接检测1et一7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 (RASmRNA／RAS蛋白质)含量减少引起的。
(3)现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子，用限制酶切开后得到仍是长度为1000 bp的DNA分子，说明此DNA分子的形态为 。
(4)某线性DNA分子分别用限制酶Hind Ⅲ和Sma I处理，然后用这两种酶同时处理，得到如下片段(kb为千个碱基对)：
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限制酶 |
片段及长度 |
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Hind Ⅲ |
2.5 kb，5.0 kb |
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Sma I |
2.0 kb，5.5 kb |
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Hind Ⅲ和Sma I |
2.5 kb，3.0 kb，2.0 kb |
可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分别有 个识别序列。两酶同时处理后得到的片段，再用限制酶EcoR I处理，结果导致凝胶上3．0 kb的片段消失，产生一种1.5 kb的新片段；那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割，则可得到长度分别为 的片段。
