题目内容
【题目】在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：
（1）A过程需要的酶有：_______________________________________。
（2）将目的基因导入植物体细胞除了上述农杆菌转化法之外，还可用________ ____ 法（任填一种）；可用__________ __ _技术检测转基抗虫棉是否成功表达出Bt毒蛋白；除抗虫基因外，基因表达载体中还必须包含的部分是__________________________ （至少写出两点）。
（3）B选择培养过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入_____________。
（4）由外植体培养为转基因植株的D、E过程分别为_______________，该过程的理论基础是_______________ ___。
【答案】（1）限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶。
（2）基因枪法（花粉管通道法） ； 抗原—抗体杂交；
启动子、终止子、标记基因。
（3）卡那霉素 （4）脱分化、再分化； 细胞的全能性
【解析】（1）图中A过程表示基因表达载体的构建，该过程需要的酶有限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶。
（2）将目的基因导入植物体细胞常用的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；可用抗原—抗体杂交法检测目的基因是否成功表达出相应蛋白质；本题中的抗虫基因为目的基因，基因表达载体中除了目的基因外，还必须包含启动子、终止子、标记基因等。
（3）根据题意可知，重组质粒上的标记基因是卡那霉素抗性基因（kan）。由于只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长，所以可用含卡那霉素的培养基对土壤农杆菌进行培养，从而筛选出含重组质粒的土壤农杆菌。
（4）由外植体培养为转基因植株是通过植物组织培养技术完成的，所以图中的D、E过程分别为脱分化和再分化；该过程的理论基础是细胞的全能性。
