Question

【题目】科研人员利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图。请回答下列问题：

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过____________技术获得重组细胞，接受细胞核的卵母细胞应处于_______时期，并用微型吸管吸出其细胞核。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其__________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为细胞核大、核仁明显，在功能上具有__________________。

（3）步骤③中，需要构建含干扰素基因的______，构建之前可以利用______技术对目的基因进行扩增。

（4）步骤③中将基因导入ES细胞的方法通常是____________法，为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因，可采用____________________技术。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 内细胞团 发育的全能性 （基因）表达载体 PCR 显微注射 DNA分子杂交

【解析】【试题分析】

本题结合利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程图，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程和细胞工程的操作步骤及相关细节；识记核移植技术的过程及应用；识记胚胎干细胞的来源及特点，能结合所学的知识准确答题。分析题图：图示为利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组胚胎的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

（1）分析图形可知，图中过程①是体细胞核移植，在获得重组胚胎之前需要通过核移植技术获得重组细胞；接受细胞核的卵母细胞应处于MⅡ时期，并用微型吸管吸出其细胞核。

（2）步骤②是早期胚胎培养，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其内细胞团分离出ES细胞；ES细胞在形态上表现为细胞核大、核仁明显，在功能上具有发育的全能性。

（3）步骤③是目的基因导入受体细胞的过程，需要构建含干扰素基因的（基因）表达载体；构建之前可以利用PCR技术对目的基因进行扩增。

（4）步骤③中将基因导入ES细胞的方法通常是显微注射法；为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因，可采用DNA分子杂交技术，若检测出杂交带，则说明ES细胞的DNA上插入了干扰素基因。