Question

【题目】PCR技术现在已经应用到临床诊断、法医鉴定、分子生物学、农牧业等领域。凡是涉及到DNA分子操作的研究工作，几乎都需要用到PCR技术。下图为某同学实验中，所用引物与模板配对情况。回答相关问题：

（1）在DNA复制中引物所起的作用是________。若所用引物为Ⅰ和Ⅱ进行扩增可以获得______种序列不同的产物；若用引物Ⅱ和Ⅲ可以获得_______种序列不同的产物。

（2）PCR技术中，复性是指引物结合到互补DNA链。复性温度过高会引起碱基之间的氢键断裂，导致______牢固结合，DNA扩增效率下降；复性温度过低会造成引物与模板的结合位点____________(填“增加”或“减少”），非特异性产物增加。

（3）利用DNA的哪一特点进行DNA含量的测定？_________________。

Answer 1

【答案】 使DNA聚合酶能够从引物的3ˊ端开始连接脱氧核苷酸 2 5 引物不能与互补DNA链（模板） 增加 DNA在260nm 的紫外线波段有一强烈的吸收峰

【解析】试题分析：明确PCR的原理、过程等相关知识，形成清晰的知识网络，据此，从题意和图示中提取有效信息，进行相关问题的解答。

(1) DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从DNA的3ˊ端延伸DNA链，因此在DNA复制中引物所起的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3ˊ端开始连接脱氧核苷酸。 DNA的合成方向总是从子链的5ˊ端向3ˊ端延伸。 若所用引物为Ⅰ和Ⅱ进行扩增，则新形成的DNA子链中不存在与引物Ⅰ和Ⅱ互补配对的碱基序列，因此可以获得2种序列不同的产物。若用引物Ⅱ和Ⅲ进行扩增，因新形成的DNA子链中，有的含有与引物Ⅱ互补配对的碱基序列，有的含有与引物Ⅲ互补配对的碱基序列，则至少在连续扩增3次后可以获得如下图所示的5种序列不同的产物（蓝色的线段表示扩增过程中新形成的DNA子链，Ⅱ和Ⅲ表示引物）。

(2) PCR技术中，复性是指引物结合到互补DNA链。复性温度过高会引起碱基之间的氢键断裂，导致引物不能与互补DNA链（模板）牢固结合，DNA扩增效率下降；复性温度过低可造成引物与模板错配，导致引物与模板的结合位点增加，非特异性产物增加。

(3) DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，峰值的大小与DNA 的含量有关。可以利用DNA的这一特点进行DNA含量的测定。