题目内容
【题目】如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域(0.2kb)。
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（1）已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表所列为酶切结果。请将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在下图中。
（2）若想在大肠杆菌中收获上述目的基因的表达产物，则需将重组质粒pZHZ2导入感受态细胞，感受态细胞的含义是______。目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是______。
（3）PCR技术DNA合成的方向总是从子链的_____延伸。PCR的每次循环分为_____三步。
【答案】 
细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 转基因生物的DNA上是否插入了目的基因 5'端向3'端延伸 变性→复性→延伸
【解析】试题分析：本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，结合问题情境，从题图和题意中提取有效信息，进行相关问题的解答。
(1) 依题意和表中信息可知：质粒pZHZ1长度为3.7kb，切去EF之间的片段（0.2kb）还剩3.5kb，含有1个限制酶G切割位点和1个限制酶H切割位点，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2，得到两种长度的片段，说明重组质粒pZHZ2的长度为1.6＋3.1＝4.7 kb，且含有2个限制酶G切割位点和2个限制酶H切割位点，因此目的基因长度为4.7－3.5＝1.2kb，目的基因中也有1个限制酶G切割位点和1个限制酶H切割位点。用限制酶G切重组质粒pZHZ2，得到1.6 kb和3.1 kb两种片段，说明目的基因内部的限制酶G切割位点距原有的限制酶E切割位点1.6－0.8＝0.8kb；用限制酶H切重组质粒pZHZ2，得到1.2kb和3.15kb两种片段，说明目的基因内部的限制酶H切割位点距原有的限制酶F切割位点1.2－0.5＝0.7kb。标注的示意图见答案。
(2) 感受态细胞的含义是：细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是：转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。
(3) PCR技术DNA合成的方向总是从子链的5'端向3'端延伸；PCR的每次循环分为三步：变性→复性→延伸。
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