题目内容
【题目】小鼠是继果蝇之后的又一种模式动物,下图1表示生产长效胰岛素转基因小鼠培育过程示意图,图2表示图1中③表达载体构建过程图示。请回答下列问题:
(1)图1中的过程①注射A物质的目的是使供体母鼠__________________,若进行体外受精,则需将未成熟的卵子培养至_______________才具备受精能力。
(2)在图2中,当目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反应管中有________种DNA片段,经过程⑧形成的重组质粒上将有______________限制酶的切点。
(3)为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达,图2的⑧过程在构建基因的表达载体时,需将目的基因插在____________________之间,将表达载体送入细胞时,图1中的过程④常用的方法是__________________。
(4)为检测是否含有目的基因,通常采用的方法是______________。为检测目的基因是否成功表达,通常采用的方法是____________________。
【答案】(1)超数排卵 减数第二次分裂中期(或MⅡ中期)
(2)4 HindⅢ(或1种)
(3)启动子、终止子 显微注射法
(4)DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交技术
【解析】
试题分析:(1)分析图1可知:过程①注射的A物质是促性腺激素,其目的是使供体母鼠超数排卵;进行体外受精时,未成熟的卵子需培养至减数第二次分裂中期(或MⅡ中期)才具备受精能力。
(2)在图2中,目的基因的DNA含有1个HindⅢ酶切位点,2个BamHⅠ酶切位点,因此当该目的基因的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后反应管中有4种DNA片段。用限制酶HindⅢ酶、BamHⅠ切割获得目的基因,用限制酶HindⅢ酶、BclⅠ切割获得质粒,因BamHⅠ和BclⅠ酶切获得的黏性末端相同,因此经过程⑧形成的重组质粒上将有HindⅢ的切点,没有BamHⅠ和BclⅠ的切点。
(3)为确保目的基因在小鼠细胞中进行表达,图2的⑧过程在构建基因的表达载体时,需将目的基因插在启动子和终止子之间,将表达载体导入动物细胞常用的方法是:显微注射法。
(4)为检测是否含有目的基因,通常采用DNA分子杂交技术;为检测目的基因是否成功表达,通常采用的方法是抗原-抗体杂交技术。