Question

【题目】科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人 凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

(1)要想目的基因只在乳腺组织中表达，在构建基因表达载体A 时,需要将_________基因和__________等调控组件重组在一起。

(2)将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是__________。将 A 导入受精卵能否获得转基因绵羊？ ______ ，判断依据是________________.

(3)核移植的受体应选用__________期卵母细胞?。

(4)移植应选择胚胎发育到________阶段时进行;转基因绵羊的性状基本上与代孕母羊无关的原因是__________.

Answer 1

【答案】人凝血因子IX 乳腺组织特异性表达的启动子 显微注射法 能 因为受精卵具有发育全能性，将受精卵体外培养成早期胚胎再胚胎移植就可获得转基因绵羊 MⅡ中 桑椹胚或囊胚 胚胎的遗传性状基本不受受体任何影响

【解析】

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。

目的基因分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

该基因工程需要对羊的性别进行选择，由于只有母羊能够分泌乳汁，因此选择母羊的胚胎进行移植。

(1) ①过程构建的A是含目的基因的（基因）表达载体。它必须将目的基因人凝血因子IX与乳（腺）蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，才能通过分泌乳汁来生产人凝血因子IX医用蛋白。

(2) 将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是显微注射法。因为受精卵具有发育全能性，将受精卵体外培养成早期胚胎再胚胎移植就可获得转基因绵羊。

(3) 在核移植之前，必须先去掉受体卵细胞的核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，核移植的受体应选用处于MⅡ中期的卵母细胞。

(4) 移植应选择胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时进行；代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。转基因绵羊的细胞核来源于供核母羊，因此转基因绵羊的性状与供核母羊最相似，基本上与代孕母羊无关。