题目内容
【题目】烟草是有重要经济价值的双子叶植物，易受TMV(烟草花叶病毒)感染而大幅度减产。绞股藍细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMⅤ感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMⅤ烟草，操作流程如图所示。
(1)①表示遗传信息流动中的___________过程，所需原料为___________。过程③所需要的工具酶是____________________________________________。
(2)大量扩增目的基因可以使用PCR技术，该技术包括变性、退火、延伸三个步骤，变性这一骤的目的是________________________________。
(3)过程④最常用的方法是___________，过程⑤用到的细胞工程技术是___________。
(4)过程⑥还需要进行基因工程操作步骤中的______________________，其中，在个体水平上检验获得的烟草能否抗TM的方法是_________________________________。
【答案】逆转录 四种脱氧核苷酸 限制酶和DNA连接酶 使DNA解旋为单链（DNA解旋） 农杆菌转化法 植物组织培养 目的基因的检测与鉴定 用TMV感染烟草，观察烟草是否被感染（患病）
【解析】
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因文库的种类，掌握两种基因文库的区别；识记PCR技术的条件；识记基因工程的具体操作步骤及相关细节，能结合所学的知识准确答题。
分析题图：①逆转录，②提取目的基因，③构建基因表达载体，④将目的基因导入受体细胞，⑤植物组织培养，⑥通过目的基因的检测与鉴定进行筛选。
(1) ①表示以RNA为模板逆转录形成DNA的过程，所需原料为DNA的单体：4种脱氧核苷酸。过程③构建基因表达载体的过程需要用同种限制酶切割目的基因与运载体，用相同的DNA连接酶连接目的基因与运载体的末端。
(2) PCR技术中的变性是利用高温使DNA发生变性，解旋形成单链。
(3)过程④将目的基因导入植物体细胞的方法常用农杆菌转化法，过程⑤受体细胞通过植物组织培养技术得到再生植株。
(4)过程⑥从再生植株中筛选成功转基因的抗TMV烟草植株还需要进行基因工程操作步骤中的目的基因的检测与鉴定；其中，若从个体水平鉴定获得的烟草能否抗TMV，可通过接种烟草花叶病毒的方法来确定。
