Question

【题目】下表是用于从土壤中分离纯化细菌的培养基配方。

请回答：

（1）培养基的类型很多，按照“细菌喜___，霉菌喜__ ”的原则配制上述 培养基后，一般还要调节 pH 并对培养基进行___处理。

（2）分离纯化微生物最常使用的划线分离法中，接种环在菌液中蘸菌液___（A．一 B．二 C．三 D．四）次；若用涂布分离法，则制备细菌悬液时，一般需进 行___处理，为确保操作过程不被杂菌污染，接种必须在___附近操作。

（3）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举一项)__ 。

Answer 1

【答案】 荤 素 高压蒸汽灭菌 A 稀释 酒精灯火焰 稀释倍数不够

【解析】试题分析：微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）培养基的类型很多，按照“细菌喜荤，霉菌喜素”的原则配制上述培养基后，一般还要调节pH，并对培养基进行高压蒸汽灭菌处理。

（2）分离纯化微生物最常使用的划线分离法中，接种环在菌液中蘸菌液一次；若用涂布分离法，则制备细菌悬液时，为防止菌液中的微生物过多，一般需进行稀释处理，为确保操作过程不被杂菌污染，接种必须在酒精灯火焰附近操作。

（3）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染。