题目内容

【题目】若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRI(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是

A. 用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体

【答案】D

【解析】EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体,产生相同的黏性末端,用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接,故A项错误;用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因会产生两种DNA片段,一种含有目的基因,一种不含目的基因(该片段相当于只用EcoRⅠ切割,故B项错误;用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,也能产生相同的黏性末端,可能会发生反向连接,故C项错误;只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,才能产生不同的黏性末端,防止发生反向连接,这样目的基因插入运载体后,RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同,故D项正确

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