Question

【题目】来那度胺是一种新型免疫调节剂，临床用于肿瘤的治疗，研究人员利用肿瘤细胞HepG2对其作用机理进行了相关研究。

实验材料：来那度胺（细胞实验中用DMSO溶解，动物实验中用橄榄油溶解）、淋巴细胞、HepG2细胞、胰蛋白酶、小鼠等。

（1）实验一 实验目的：________________________。

将贴壁生长的HepG2细胞用______处理，调整至恰当的细胞浓度，分别设置实验组合对照组。实验组分别加入等量的高剂量（15μmol·L）、中剂量（10μmol·L）、低剂量（1μmol·L）的来那度胺溶液，对照组加入等量的DMSO溶液。24h后测定细胞存活率，实验结果如下表。

浓度/μmol·L-1	0	1	10	15
细胞存活率/%	100. 0	98. 21	97. 12	96. 87

实验结果说明了来那度胺对HepG2细胞毒性很小。

（2）实验二 研究来那度胺的免疫调节作用。

实验组：将HepG2细胞与___________按一定比例混合，_____________________；

对照组：_____________________________________________________________________________。

培养一段时间后统计各组肿瘤细胞的凋亡率。统计结果如下表，说明__________________。

浓度/μmol·L-1	对照组	1	10	15
凋亡率/%	3	13. 4	29. 3	55. 3

（3）实验三 研究来那度胺发挥免疫调节作用的机理

取生理状态一致的小鼠腋下移植1mL的__________细胞悬液，1周后取移植成功小鼠进行实验，实验组分别用等量高、中、低剂量组的来那度胺溶液灌胃，对照组小鼠每次给予______灌胃给药，连续给药14d后处死小鼠，取肿瘤组织进行测量，发现实验组肿瘤组织明显小于对照组。检测相关物质的表达量，发现一方面组织内辅助性T细胞分泌的白细胞介素-2等多种蛋白质含量明显提高，有效促进了淋巴细胞的分裂分化。另一方面T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白表达量________（T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白结合后可以抑制T细胞的活性，使其无法识别癌细胞），两方面都有效增强了淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤作用。

Answer 1

【答案】研究来那度胺对HepG2细胞的毒性 胰蛋白酶 淋巴细胞 分别加入高、中、低剂量的来那度胺溶液 将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合，加入等量的DMSO 来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤能力，且浓度越高杀伤能力越强 HepG2细胞 等量橄榄油 下降

【解析】

依题文可知，实验一中要根据自变量和因变量的内容来确定实验目的；实验二中根据实验目的写实验步骤时要遵循单一变量等实验原则；实验三中要利用题干信息“动物实验中用橄榄油溶解”解答。

（1）根据题文可知，实验一中的自变量是来那度胺的剂量，因变量是HepG2细胞的存活率，实验结果说明来那度胺对HepG2细胞毒性很小，由此该实验目的是研究来那度胺对HepG2细胞的毒性。贴壁生长的细胞用胰蛋白酶处理使其分开，从而调整细胞浓度。

（2）依题文可知，实验目的是研究来那度胺的免疫调节作用，再结合实验结果可以确定来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的免疫力，所以自变量是来那度胺的有无，因变量是HepG2细胞的凋亡率。由此实验组：将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合，分别加入高、中、低剂量的来那度胺溶液；对照组：将HepG2细胞与淋巴细胞按一定比例混合，加入等量的DMSO；实验结论：来那度胺能增强淋巴细胞对HepG2细胞的杀伤能力，且浓度越高杀伤能力越强。

（3）依题文实验目的是研究来那度胺发挥免疫调节作用的机理，由此小鼠腋下移植的是HepG2细胞悬液，从而培育有免疫对象的实验鼠。依据实验目的可知要遵循单一变量原则，再有“动物实验中用橄榄油溶解”的信息，对照组小鼠需要每次给予等量橄榄油灌胃给药。据题文信息“T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白结合后可以抑制T细胞的活性，使其无法识别癌细胞”“两方面都有效增强了淋巴细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤作用”可知，T细胞表面的PD-1蛋白和癌细胞表面的PD-L1蛋白表达量都下降。