Question

【题目】图1表示“华恢1号”抗虫水稻主要培育流程，据图1回答：
（1）杀虫基因通过①～④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做 ．
（2）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．图2是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图2分析： ①人工改造质粒时，要使抗虫基因能成功表达，还应插入 ．
②人工改造质粒时，用限制酶Ⅰ处理，其目的是：
第一，去除质粒上（基因），保证T﹣DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；
第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于 ．
第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等．
③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒．分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的情况是 ．
（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为 ，则该酶识别的核苷酸序列是 ．

Answer 1

【答案】
（1）转化
（2）启动子；tms和tmr；目的基因（或外源DNA）准确插入；在含卡那霉素的培养基中能够生长,而在含四环素的培养基中不能生长
（3）GACGTC
【解析】解：（1）转化是指目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，图中①～④表示该过程．（2）①启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．②图中看出，tms基因能够编码生长素，tmr基因能够编码细胞分裂素，这两种激素能够促进植物的生长．因此人工改造时用限制酶Ⅰ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的tmr、tms，保证T﹣DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；另外只有一个插入位点，也有利于目的基因（或外源DNA）准确插入．③若用限制酶Ⅱ切割改造过的理想质粒，质粒上的抗四环素的标记基因（tet）就会破坏，所以以含四环素和卡那霉素的培养基培养后，在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长．（3）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为 ，则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC．

所以答案是：（1）转化（2）①启动子②tms和tmr　目的基因（或外源DNA）准确插入③在含卡那霉素的培养基中能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长（3）GACGTC

【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术即可以解答此题．