题目内容
【题目】科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料，比较苯酚—氯仿抽提法（方法A）和盐析法（方法B）提取血液中DNA的效率。图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶的活性的作用，SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程和结果如下：
提取过程：
实验结果：
测定项目 | 金定鸭 | 长乐灰鹅 | 象洞鸡 | |||
方法A | 方法B | 方法A | 方法B | 方法A | 方法B | |
纯度/OD值 | 1.95 | 1.96 | 1.85 | 2.36 | 1.96 | 1.90 |
浓度/μg.mL-1 | 534.29 | 240.00 | 899.17 | 583.33 | 385.35 | 914.17 |
（注）纯DNA的OD值为1．8，OD值在1．75～1．85间，DNA纯度较好；OD值高于1．8，一般有RNA污染；OD值小于1．8，一般有蛋白质或其他物质污染。
请回答：
（1）本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是__________________________________。
（2）步骤①中，若只用蛋白酶K消化处理，对实验结果的影响是______________________。
（3）步骤③中，破碎细胞常用的操作方法是___________________。步骤⑤加入蒸馏水的目的是_______________________________________。
（4）苯酚和氯仿-异戊醇不溶或微溶于水，密度均大于水，步骤②⑦所依据的原理是____________________________________________。
（5）对于长乐灰鹅来说，较适宜的DNA提取方法是_____________。
（6）实验结果表明，不同方法提取的DNA中，影响DNA纯度的主要物质是___________。相同体积的不同鸟类的血液DNA提取量有明显差异，其原因可能是_____________________________。
【答案】哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和线粒体（只有白细胞中含有DNA） DNA的提取量减少，纯度降低 向血细胞液中加入一定量的蒸馏水，并用玻璃棒搅拌 降低NaCl溶液的浓度，析出DNA DNA不溶于苯酚、氯仿-异戊醇，蛋白质等杂质溶于苯酚、氯仿-异戊醇 苯酚—氯仿抽提法（方法A） RNA 不同鸟类血液中血细胞的密度不同（或不同鸟类血细胞中DNA含量不同）
【解析】
DNA粗提取与鉴定的原理
DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氧化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时，DNA的溶解度最大；浓度为 0.14 mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。DNA不溶于95%的酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。DNA能与二苯胺(沸水浴)反应生成蓝色物质，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
（1）哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和线粒体，而细胞核和线粒体中含有的DNA，其中只有白细胞中含有DNA，因此本实验不能选择哺乳动物血液为实验材料来提前DNA。
（2）步骤①中，同时使用的EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶活性的作用，因此，若改为只用蛋白酶K消化处理，会导致实验中提取DNA的提取量减少，纯度降低。
（3）步骤③中，通常向血细胞液中加入一定量的蒸馏水，并用玻璃棒搅拌以加速血细胞破碎。因为DNA在2mol/L的NaCl溶液溶解度最大，高于或低于这一浓度都会导致DNA的溶解度减小，因此，步骤⑤加入蒸馏水的目的是为了降低NaCl溶液的浓度，从而使DNA的溶解度降低，使DNA析出。
（4）根据苯酚和氯仿-异戊醇不溶或微溶于水，密度均大于水，并且DNA不溶于苯酚、氯仿-异戊醇，蛋白质等杂质溶于苯酚、氯仿-异戊醇的原理进行步骤②⑦的操作实现了DNA的提纯。
（5）对于长乐灰鹅来说，利用苯酚—氯仿抽提法（方法A）提取的DNA纯度好，而且含量也高，因此较适宜的DNA提取方法是方法A。
（6）实验结果表明，不同方法提取的DNA中，其纯DNA的OD值均大于1.85，根据题意可知，影响DNA纯度的主要物质是RNA。相同体积的不同鸟类的血液DNA提取量有明显差异，其直接的影响因素是不同鸟类血液中血细胞的密度不同导致的DNA含量的不同。
【题目】为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株，科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星，卫星返回后进行筛选，其主要流程如下图，其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答：
（1）与步骤②相比，步骤③的培养基成分还含有__________、___________。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是___________。
（2）步骤③中，应在_____________附近倒平板，不采用涂布平板接种的原因是___________________________________________________________。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌，这里的准确筛选的主要依据是_______________________________________。
（3）按功能分，步骤③中培养基属于______________________培养基。
（4）科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到下表所示结果（单位：g/L），最终确定卫10为最优菌株，依据是___________。
传代次数 | 菌株 | |||
卫10 | 卫32 | 卫56 | 卫69 | |
2 | 70.78 | 71.23 | 70.52 | 69.24 |
5 | 70.23 | 69.52 | 67.46 | 65.56 |
8 | 69.58 | 62.16 | 60.52 | 61.53 |
11 | 70.75 | 55.69 | 52.42 | 55.72 |
14 | 69.42 | 42.28 | 40.22 | 44.38 |
（5）若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度，试写出实验思路___________________________。
