Question

9．图是基因工程示意图，请据图回答：
（1）从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）．
（2）进行过程①时，需用限制酶切开载体以插入目的基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动目的基因转录，该部位称为启动子．
（3）构建基因表达载体的目的是使使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（4）若用重组质粒转入大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力弱．
（5）在抗虫作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时，常用的方法是农杆菌转化法．
（6）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要用标记的目的基因做探针，再与相应的物质杂交．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取（从基因文库中获取、利用PCR技术体外扩增、化学合成法）；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等．将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵．

解答 解：（1）从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）．
（2）在基因表达载体的构建过程中，需用限制酶切开载体以插入目的基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动目的基因转录，该部位称为启动子．
（3）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（4）若用重组质粒转入大肠杆菌，一般情况下，由于未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力弱，因此不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞．
（5）在抗虫作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时，常用的方法是农杆菌转化法．
（6）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要用标记的目的基因做探针，再与相应的物质杂交．
故答案为：
（1）热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）
（2）限制   启动子
（3）使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（4）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力弱
（5）农杆菌转化法       
（6）标记的目的基因

点评 本题主要考查基因工程的原理和技术，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力．