题目内容
降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如图。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:
(1)Klenow酶是一种__________酶,合成的双链DNA有__________个碱基对。
(2)获得的双链DNA经EcoR__I(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamH_I(识别序列和切割位点-G↓GATTC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它__________。
②设计EcoR_I和BamH_I进行双酶切割的目的是__________。
③要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有__________。
(3)经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是__________。
(1)DNA聚合酶 126
(2)①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少(答案合理也给分)
②保证目的基因和载体定向连接(或防止目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接)
③标记基因
(3)合成的核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基的现象
考查的是基因工程中目的基因的合成及导入。
(1)72×2-18=126;
(2①繁殖快,能迅速获得大量目的基因;单细胞结构简单;
②会出现质粒与质粒、目的基因与目的基因的连接;
③通过检测标记基因,看目的基因是否导入宿主细胞。[来源:ZXX
(3)最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是合成的核苷酸单链仍较长,产生缺失碱基的现象。