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菊天牛是菊花的最主要的害虫,科研人员将抗虫基因转入菊花培育出抗虫菊花,下图是获得转基因菊花的技术流程。请回答下列问题:

注:卡那酶素抗性基因(kanR)为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感

(1)利用PCR技术扩增抗虫基因时,需用耐高温的___________催化,PCR—般要经历三十次以上的循环,每次循环包括_____________三步。

(2)常用Ca2+处理土壤农杆菌,其目的是______________。重组Ti质粒整合到菊花叶肉细胞的________上。

(3)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及_________的固体培养基中,在适宜条件下进行培养,筛选转基因菊花。检验转基因菊花的抗虫性状,常用的方法是______________。

(4)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫,实验组饲喂转基因植株,对照组应饲喂等量的正常植株。实验结果显示,实验组的害虫死亡率明显高于对照组,说明__________。

练习册系列答案
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I.科学家将人的生长激素基因与pBR322质粒进行重组,得到的重组质粒导入牛的受精卵,使其发育为转基因牛,再通过细胞工程培育为转基因克隆牛。pBR322质粒含有两个抗生素抗性基因和5个限制酶切点(如图2)。将重组质粒导入大肠杆菌,并成功地在大肠杆菌中得以表达。请据图回答问题。

(1)图1中显示的人的生长激素基因是通过人工合成的,图中①过程需要的酶是__________。该过程所依据的碱基互补配对原则是___________________________(用字母和箭头表示)。

(2)图1中的mRNA是从人体的_______________细胞中获取。

(3)重组质粒形成与否需要鉴定和筛选,方法是将重组质粒的DNA分子导入大肠杆菌,通过含抗生素的培养基进行培养,观察大肠杆菌的生长、繁殖情况进行判断,如图3所示:

如果受体菌在培养基A上能生长、繁殖形成菌落,而不能在培养基B上生长、繁殖,则使用限制酶a的切点是图2中的___________________________________,即目的基因插入了___________________中。

II.SRY基因是Y染色体上的性别决定基因,SRY—PCR胚胎性别鉴定技术能准确鉴定早期胚胎性别,应用前景十分广阔。请回答相关问题:

用SRY—PCR法鉴定胚胎性别需要充足的材料并保证被测胚胎的活性,因此,首先从被测胚胎中取出几个细胞,提取_______________,然后用________________的一段脱氧核苷酸序列作引物,进行PCR扩增。鉴定扩增产物,制备具有SRY基因特异性的探针,出现阳性反应者,胚胎为__性。

人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用基因工程和克隆技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下:

Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子,通过体外受精,形成受精卵;

Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵,形成重组细胞;

Ⅲ.电脉冲剠激重组细胞,促使其形成早期胚胎;

Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中,最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题:

(1)实验步骤Ⅰ中,在体外受精前,需要对奶牛的精子进行_______处理。受精时,往往一个卵母细胞只能和一个精子结合,受精过程中防止多精入卵的生理反应包括__________。

(2)实验步骤Ⅱ中,将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有敎的方法是__________。导入基因前,需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起,这一步骤的目的是__________。

(3)实验步Ⅲ中,进行动物早期胚胎的体外培养时,培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外,还要添加___________和动物血清。

(4)实验步骤Ⅳ中,应选择性别为___________的奶牛胚胎进行移植。

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