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【题目】基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选.已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC﹣,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣.根据图示判断下列操作正确的是(
A.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C.质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割
D.质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割

【答案】D
【解析】解:限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣,限制酶II的识别序列和切点是﹣GATC﹣,可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端.据题图可知,目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣和限制酶II的识别序列和切点是﹣GATC﹣,只有用限制酶II才能将目的基因切割下来.质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因,分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列;如果用限制酶II切割,则GeneI 和GeneⅡ都被破坏,造成重组质粒无标记基因;用限制酶I切割,则破坏GeneⅡ,保留GeneI,其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同,可以连接形成重组DNA. 故选:D.
由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列,限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列.要将目的基因从该DNA链中提取出来,需要在目的基因左右切开,所以要用限制酶Ⅱ;质粒不能用限制酶Ⅱ,如果用该酶的话,质粒就会有两个切口.

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