题目内容
【题目】请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答下列问题：
（1）将实验流程按先后顺序补充完整：________、_________。
（2）凝胶色谱法的基本原理是根据________________分离蛋白质。
（3）洗涤红细胞的目的是去除_________，洗涤干净的标志是________________。为防止血液凝固，在采血容器中通常要预先加入___________。
（4）凝胶色谱操作结束后，需要用电泳来对蛋白质进行纯度鉴定，电泳利用了待分离样品中各种分子的 ____________的特性，使带电分子产生不同的________，从而实现样品中各种分子的分离。
（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS_________，从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。
【答案】血红蛋白的释放 凝胶色谱柱的装填 蛋白质相对分子质量的大小 杂蛋白（或血浆蛋白） 离心后的上清液不再呈现黄色 柠檬酸钠 带电性质差异以及分子本身的大小、性状的不同 迁移速度 所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别
【解析】
理清血红蛋白的提取和分离的实验原理、样品处理和凝胶色谱操作的流程及其注意事项等相关知识。在此基础上，以图示中的“箭头指向和文字信息”为切入点，从中把握所蕴含的生物学信息，进而对相关题情境进行分析解答。
（1）血红蛋白的提取和分离流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱。可见，A表示血红蛋白的释放，B表示凝胶色谱柱的装填。
（2）凝胶色谱法的基本原理是：根据相对分子质量的大小分离蛋白质。
（3）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。洗涤干净的标志是离心后的上清液不再呈现黄色。为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬酸钠，其比例是每100mL血液加入3.0g柠檬酸钠。
（4）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质差异以及分子本身的大小、性状的不同的特性，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质-SDS复合物，由于SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，从而使电泳的迁移率完全取决于分子的大小。
【题目】胆固醇是人体内一种重要的脂质，既可在细胞内以乙酰CoA为原料合成，也可以LDL（一种脂蛋白）的形式进入细胞后水解形成。下图表示人体细胞内胆固醇的来源及调节过程。请分析并回答：
（1）胆固醇在细胞中合成的场所是_______，它是构成_______结构的重要成分。
（2）从图中分析可知，细胞内过多的胆固醇可作为信息，使细胞通过①_______、②_______和③_______三条途径调节胆固醇的含量，这种调节机制属于_______调节。
（3）姜黄素是降脂中药姜黄的提取物，科学家为研究姜黄素的降脂机理，设计实验研究姜黄素对培养的小鼠巨噬细胞LDL受体的影响。
第一步：取小鼠的巨噬细胞用培养液制成细胞悬液，放入CO2培养箱中，在适宜的______条件下进行增殖培养。为避免代谢产物积累对细胞造成危害，应_______。
第二步：分别用含姜黄素浓度为0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培养液培养巨噬细胞，对照组则用_______培养，每组5个样本，每个样本中巨噬细胞数量为5.0×105。
第三步：培养2天后，将样本经一系列处理，再分别用仪器测定每组的光密度值（光密度值与受体数量呈正相关）。
实验结果如下:
实验处理 | 对照组 | 实验组 | ||
姜黄素浓度 | ||||
0.3μg/mL | 0.6μg/mL | 0.9μg/mL | ||
光密度值 | 0.126 | 0.379 | 0.420 | 0.992 |
上述实验可以得出的结论是：___________________。
