题目内容
【题目】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:
(1)htPA基因与载体用________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用____________技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其________。采集的精子需要经过________,才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。
【答案】 同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交(或核酸探针) 超数排卵 获能(处理) 显微注射法 性别鉴定
【解析】试题分析:DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。目的基因分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。该基因工程需要对羊的性别进行选择,由于只有母羊能够分泌乳汁,因此选择母羊的胚胎进行移植。
(1)htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)切割,形成相同的黏性末端,然后再通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体;检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交(或核酸探针)技术。
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其超数排卵.采集的精子需要经过获能(处理),才具备受精能力。
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定,以选择母羊的胚胎进行移植。
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